a 2008

Biomarker discovery in low grade breast cancer using isobaric stable isotope tags and two-dimensional liquid chromatography-tandem mass spectrometry (iTRAQ-2DLC-MS/MS) based quantitative proteomic analysis

BOUCHAL, Pavel, Theodoros ROUMELIOTIS, Roman HRSTKA, Rudolf NENUTIL, Bořivoj VOJTĚŠEK et. al.

Basic information

Original name

Biomarker discovery in low grade breast cancer using isobaric stable isotope tags and two-dimensional liquid chromatography-tandem mass spectrometry (iTRAQ-2DLC-MS/MS) based quantitative proteomic analysis

Name in Czech

Detekce potenciálních biomarkerů karcinomu prsu nízkého stupně malignity pomocí proteomové analýzy na principu isobarického značení stabilními izotopy, dvourozměrné chromatografie a tandemové hmotnostní spektrometrie (iTRAQ-2DLC-MS/MS)

Authors

BOUCHAL, Pavel, Theodoros ROUMELIOTIS, Roman HRSTKA, Rudolf NENUTIL, Bořivoj VOJTĚŠEK and Spiros D. GARBIS

Edition

Biomarker Discovery Europe, 2008

Other information

Language

English

Type of outcome

Konferenční abstrakt

Field of Study

10600 1.6 Biological sciences

Country of publisher

Ireland

Confidentiality degree

není předmětem státního či obchodního tajemství

Organization unit

Faculty of Medicine

Keywords in English

Biomarker discovery; iTRAQ-2DLC-MS/MS; breast cancer

Tags

International impact
Změněno: 13/11/2008 18:28, doc. Mgr. Pavel Bouchal, Ph.D.

Abstract

V originále

The present pilot study constitutes a proof-of-principle in the use of proteomic method incorporating iTRAQ stable isotope labeling, two-dimensional liquid chromatography, nanoelectrospray ionization and high resolution tandem mass spectrometry using the hybrid QqTOF platform (iTRAQ-2DLC-MS/MS) for the comparative analysis of two low-grade breast primary tumor tissues with and without metastases and metastasis in lymph node relative to the nonmetastatic tumor type. The principal aims of this study were (1) to define the protein spectrum obtainable using this approach, and (2) to highlight potential candidates for verification and validation studies focused on biomarkers involved in metastatic processes in low-grade breast cancer. The study resulted in the reproducible identification of 605 nonredundant proteins (p<0.05). A quantitative comparison revealed 3/3 proteins with significantly increased/decreased level in metastatic primary tumor and 13/6 proteins with increased/decreased level in lymph node metastasis compared to nonmetastatic primary tumor (p<0.01). Changes in selected differentially expressed proteins were verified with qRT-PCR with good intra-assay correlation.

In Czech

Prezentovaná studie představuje první využití metody proteomové analýzy na principu kombinace značení stabilními izotopy, dvourozměrné chromatografie a tandemové hmotnostní spektrometrie (iTRAQ-2DLC-MS/MS) pro srovnání proteinového složení dvou primárních nádorů prsu nízkého stupně malignity (metastazující a nemetastazující) a metastáze v lymfatické uzlině. Hlavními cíli studie bylo: (1) definovat proteinové spektrum detegovatelné touto metodou a (2) odhalit protenciální kandidátní biomarkery pro následné ověřovací a validační studie. Pomocí studie bylo detegováno 605 proteinů (p<0.05), z nichž 3/3 proteiny měly zvýšenou/sníženou hladinu v metastazujícím primárním nádoru a 13/6 proteinů mělo zvýšenou/sníženou hladinou v metastázi v lymfatické uzlině ve srovnání s nemetastazujícím primárním nádorem. Změny v hladinách vybraných proteinů byly úspěšně validovány pomocí kvantitativní PCR v reálném čase.

Links

GP203/07/P471, research and development project
Name: Studium molekulárních mechanismů adaptace bakterií na změny prostředí pomocí proteomických technik
Investor: Czech Science Foundation, The study of molecular mechanisms of bacterial adaptation to environmental changes using proteomic techniques
LC06035, research and development project
Name: Centrum biofyzikální chemie, bioelektrochemie a bioanalýzy. Nové nástroje pro genomiku, proteomiku a biomedicínu.
Investor: Ministry of Education, Youth and Sports of the CR, Centre of Biophysical Chemistry, Bioelectrochemistry and Bioanalysis. New Tools for Genomics, Proteomics and Biomedicine
MSM0021622413, plan (intention)
Name: Proteiny v metabolismu a při interakci organismů s prostředím
Investor: Ministry of Education, Youth and Sports of the CR, Proteins in metabolism and interaction of organisms with the environment
MZ0MOU2005, plan (intention)
Name: Funkční diagnostika zhoubných nádorů