p 2008

Functionalised magnetic microspheres for molecular diagnostic applications

RITTICH, Bohuslav, Alena ŠPANOVÁ and Daniel HORÁK

Basic information

Original name

Functionalised magnetic microspheres for molecular diagnostic applications

Name in Czech

Využití funkcionalizovaných magnetických mikročástic v molekulární diagnostice

Authors

RITTICH, Bohuslav, Alena ŠPANOVÁ and Daniel HORÁK

Edition

3rd International Congress on Bioprocesses in Food Industries (ICBF 2008), 2008

Other information

Language

English

Type of outcome

Vyžádané přednášky

Field of Study

Genetics and molecular biology

Country of publisher

India

Confidentiality degree

není předmětem státního či obchodního tajemství

Organization unit

Faculty of Science

Keywords in English

nonporous magnetic hydrophilic microspheres; P(HEMA-co-EDMA); P(HEMA-co-GMA); PGMA; enzymes immobilization; molecular diagnostics; PCR

Tags

International impact
Změněno: 28/12/2008 15:52, doc. Ing. Bohuslav Rittich, CSc.

Abstract

V originále

Magnetic nonporous hydrophilic microspheres poly(2-hydroxyethyl methacrylate-co-ethylene dimethacrylate)-(P(HEMA-co-EDMA), poly(2-hydroxyethyl methacrylate-co-glycidyl methacrylate)-P(HEMA-co-GMA), and poly(glycidyl methacrylate)-PGMA with hydrophilic properties were prepared by single-step dispersion polymerisation in the presence of sterically or electrostatically stabilised colloidal magnetite or maghemite. For the evaluation of stringent requirements for molecular diagnostics, original PCR application of magnetic microspheres was developed. Several enzymes, such as RNase A, DNase I, proteinase K and Salmonella antibodies were immobilised on the microspheres and their applicability in degradation of bacterial RNA, chromosomal and plasmid DNA, degradation of intracellular PCR inhibitors and immunomagnetic separation of Salmonella cells were demonstrated. Adsorption of DNA macromolecules on the surface of poly(N-isopropylacrylamide) (PNIPAAm) thermoresponsive particles was also studied.

In Czech

Magnetické mikročástice (P(HEMA-co-EDMA), P(HEMA-co-GMA) a PGMA s hydrofilními vlastnostmi byly připraveny jednostupňovou dispersní polymerizací. Stericky nebo electrostaticky stabilizovaný koloidní magnetit byl připraven srážením Fe2+ a Fe3+ solí a byl enkapsulován dispersní (ko)polymerizací HEMA a GMA. Na mikročástice byly imobilizovány enzymy RNasa A, DNasa I, proteinasa K a protilátky proti buňkám Salmonella. Jejich aktivita byla ověřena pomocí degredace bakteriální RNA, chromosomální a plazmidové DNA, magnetické separace buněk Salmonella nebo degradací jejich intracelulárních inhibitorů PCR. Rovněž byly studována adsorpce makromolekulrní DNA na povrch termoresponzivních poly(N-isopropylakrylamid) (PNIPAAm) částic.

Links

1G57037, research and development project
Name: Aplikace molekulárně biologických metod pro efektivní využití genetických zdrojů BMK a pro charakterizaci kvality funkčních potravin.
Investor: Ministry of Agriculture of the CR, Aplication of molecular biology methods for the effective use of genetic sources of LAB and the characterisation of functional foods quality
2B06053, research and development project
Name: Nové postupy při charakterizaci a identifikaci probiotických kmenů bakterií vhodných pro funkční potraviny.
Investor: Ministry of Education, Youth and Sports of the CR, New methods for the characterization and identification of probiotic bacterial strains suitable for functional foods