a 2008

Generation of Specific Antibodies Against Plant Telomere Binding Proteins

PROCHÁZKOVÁ SCHRUMPFOVÁ, Petra and Jiří FAJKUS

Basic information

Original name

Generation of Specific Antibodies Against Plant Telomere Binding Proteins

Name in Czech

Vývoj specifických protilátek proti rostlinným telomer-vazebným proteinům.

Authors

PROCHÁZKOVÁ SCHRUMPFOVÁ, Petra (203 Czech Republic, guarantor) and Jiří FAJKUS (203 Czech Republic)

Edition

Protein Expression Europe & Antibodies Europe, 2008

Other information

Language

English

Type of outcome

Konferenční abstrakt

Field of Study

Genetics and molecular biology

Country of publisher

United States of America

Confidentiality degree

není předmětem státního či obchodního tajemství

RIV identification code

RIV/00216224:14310/08:00025187

Organization unit

Faculty of Science

Keywords in English

antibody; AtTRB proteins; plant

Tags

International impact
Změněno: 9/4/2010 12:54, prof. RNDr. Jiří Fajkus, CSc.

Abstract

V originále

AtTRB (Telomeric Repeat Binding) proteins bind plant telomeric sequence (TTTAGGG)n via their Myb domain, similarly to human hTRF1 or hTRF2 (Telomeric Repeat Factor) which bind to human telomeric sequence (TTAGGG)n. In A. thaliana there are five AtTRB homologues. All AtTRBs contain Myb domain at the N-terminus, central H1/5-like domain and coiled-coil domain at the C-terminus. Even though they are similar at AA sequence they partly differ in their chemical properties or in expression levels in different plant compartments. To determine more precisely the binding sequence of AtTRB proteins and their intracellular localization in vivo we need to get specific antibodies for ChIP experiments. We have expressed the least similar peptide sequence of each AtTRB protein that is located in the loop between Myb domain and H1/5 domain in E. coli.

In Czech

AtTRB proteiny se vážící se na telomerickou DNA skrz jeich Myb vazebnou doménu, stejně jako lidské hTRF1 a hTRF2. V A. thaliana bylo objeveno 5 homologů AtTRB proteinů. Všechny obsahují C-koncovou Myb doménu a centrální H1/5-like doménu. Vzhledem k vysoké podobnosti všech pěti proteinů bylo nutno při návrhu specifických protilátek vytipovat nejméně homologní oblast. Tato oblast lokalizovaná mezi Myb doménou a h1/5 doménou, byla naklonována do expresních vektorů a exprimována v bakteriálním expresním systému. Takto exprimovanými proteiny byly imunizovány myši, které vytváření monoklonální protilátky, specificky rozeznávající jednotlivé AtTRB proteiny.

Links

GP521/08/P452, research and development project
Name: Charakterizace a funkční diverzita proteinů rodiny SMH, která je specifická pro rostliny
Investor: Czech Science Foundation, Characterisation of functional diversity of the plant-specific SMH family of proteins
MSM0021622415, plan (intention)
Name: Molekulární podstata buněčných a tkáňových regulací
Investor: Ministry of Education, Youth and Sports of the CR, Molecular basis of cell and tissue regulations