Molekulární detekce lokusu makrolidové rezistence u klinických izolátů syfilis v České republice.

MATĚJKOVÁ POSPÍŠILOVÁ, Petra, Magdalena FLASAROVÁ, Hana ZÁKOUCKÁ, Vladana WOZNICOVÁ and David ŠMAJS. Molekulární detekce lokusu makrolidové rezistence u klinických izolátů syfilis v České republice. (Molecular detection of locus of macrolide resistance in syphilis clinical isolates from Czech Republic.). In XVIII. Tomáškovy dny. 2009.

Basic information

• Original name: Molekulární detekce lokusu makrolidové rezistence u klinických izolátů syfilis v České republice.
• Name (in English): Molecular detection of locus of macrolide resistance in syphilis clinical isolates from Czech Republic.
• Authors: MATĚJKOVÁ POSPÍŠILOVÁ, Petra, Magdalena FLASAROVÁ, Hana ZÁKOUCKÁ, Vladana WOZNICOVÁ and David ŠMAJS.
• Edition: XVIII. Tomáškovy dny, 2009.

Other information

• Original language: Czech
• Type of outcome: Conference abstract
• Field of Study: 10600 1.6 Biological sciences
• Country of publisher: Czech Republic
• Confidentiality degree: is not subject to a state or trade secret
• Organization unit: Faculty of Medicine
• Keywords (in Czech): makrolidová rezistence; syfilis
• Keywords in English: macrolide resistance; syphilis

Abstract

Primární detekce genetického materiálu T. pallidum u klinických vzorků zahrnovala dvoukrokovou PCR dvou nezávislých treponemálních lokusů (tmpC, polA). U pozitivních vzorků byl dále amplifikován úsek 23S rDNA zahrnující pozici 2058. Amplikony byly sekvencovány dideoxynukleotidterminátorovou metodou s pomocí původních amplifikačních primerů s cílem potvrdit nebo vyloučit přítomnost mutace. V letech 2005-2008 bylo shromážděno 28 PCR pozitivních klinických vzorků od 22 pacientů z různých regionů České republiky. U 14 pacientů (63,6 %) byl diagnostikován kmen citlivý k makrolidům. Čtyři pacienti (18,2 %) byli infikování kmenem, který v genu pro 23S rRNA nesl mutaci A2058G. U čtyř dalších pacientů byl zjištěn výskyt kmene se záměnou A na G v pozici 2059, která nebyla doposud popsána. U jednoho z těchto pacientů bylo zaznamenáno selhání léčby makrolidovým preparátem obsahujícím spiramycin. Molekulární vyšetření lokusu rezistence k makrolidům u syfilitických klinických vzorků vedlo k objevu nové mutace, která způsobuje rezistenci syfilis k léčbě makrolidy. Tato mutace způsobuje rezistenci k makrolidům také u jiných druhů bakterií. Získané výsledky dále naznačují, že geneticky kódovaná rezistence k makrolidům je u syfilis v České republice relativně častá (36,4 %). Tato vysoká pravděpodobnost selhání léčby makrolidy zdůrazňuje nutnost následné kontroly úspěšnosti léčby u pacientů se syfilis.

Abstract (in English)

Primary screening of clinical specimen included nested PCR detection of two T. pallidum specific loci (tmpC, polA). In PCR positive samples, 23S rDNA locus comprising position 2058 was amplified. The amplicon was subjected to Sanger sequencing using original amplification primers with the aim to detect mutations in corresponding part of the 23S rRNA gene. The set of 28 clinical isolates with detectable genetic material were collected from 22 patients in the Czech Republic in the time period 2005-2008. 14 patients (63.6%) were infected with macrolide sensitive strain of T. pallidum. Four patients (18.2%) were diagnosed with a strain bearing the A2058G transition and four patients (18.2%) with a strain bearing the A2059G mutation (spiramycin treatment failure was reported in one of these patients). Screening of clinical samples revealed a novel mutation at the position 2059 of the T. pallidum 23S rRNA gene. This mutation causes macrolide resistance in several other bacteria. Presented results show that macrolide resistant isolates of T. pallidum bearing A2058G and A2059G mutations are relatively abundant in the Czech Republic. High probability of macrolide treatment failure emphasizes the need of the follow-up of syphilis patients.

Links

• GA310/07/0321, research and development project: Name: Komparativní genomové sekvencování patogenních treponem a transkriptomová analýza T. pallidum ssp. pallidum

Investor: Czech Science Foundation

• MSM0021622415, plan (intention): Name: Molekulární podstata buněčných a tkáňových regulací

Investor: Ministry of Education, Youth and Sports of the CR, Molecular basis of cell and tissue regulations

• NR8967, research and development project: Name: Molekulární typizace kmenů a izolátů Treponema pallidum subsp. pallidum: základ pro epidemiologickou a klinickou identifikaci jednotlivých kmenů

Investor: Ministry of Health of the CR