MICHALCOVÁ, Lenka, Radka DOPITOVÁ, Jan HEJÁTKO, Markéta RYVOLOVÁ, Martina VÁLKOVÁ a Jan PREISLER. CE-LIF of Green Fluorescent Fusion Proteins for Investigation of Phosphorylation. In 8 th International Interdisciplinary Meeting on Bioanalysis, CECE 2011. ISBN 978-80-904959-0-6. 2011.
Další formáty:   BibTeX LaTeX RIS
Základní údaje
Originální název CE-LIF of Green Fluorescent Fusion Proteins for Investigation of Phosphorylation
Název česky Výzkum fosforylace GFP fúzních proteinů pomocí techniky CE-LIF
Autoři MICHALCOVÁ, Lenka (203 Česká republika, domácí), Radka DOPITOVÁ (203 Česká republika, domácí), Jan HEJÁTKO (203 Česká republika, domácí), Markéta RYVOLOVÁ (203 Česká republika, domácí), Martina VÁLKOVÁ (203 Česká republika, domácí) a Jan PREISLER (203 Česká republika, garant, domácí).
Vydání 8 th International Interdisciplinary Meeting on Bioanalysis, CECE 2011, 2011.
Další údaje
Originální jazyk angličtina
Typ výsledku Konferenční abstrakt
Obor 10406 Analytical chemistry
Stát vydavatele Česká republika
Utajení není předmětem státního či obchodního tajemství
Kód RIV RIV/00216224:14740/11:00050124
Organizační jednotka Středoevropský technologický institut
ISBN 978-80-904959-0-6
Klíčová slova česky CE-LIF, fosforylace, AHP proteiny
Klíčová slova anglicky CE-LIF; phosphorylation; AHP proteins
Štítky rivok
Změnil Změnila: Mgr. Nikola Kostlánová, Ph.D., učo 12689. Změněno: 2. 4. 2012 14:51.
Anotace
In this study, CE-LIF with 405 nm laser diode was used to study AHP5 fused with GFP. AHP5-GFP fusion proteins overexpressed in E. coli were used for initial optimization of CE-LIF technique because of lower concentrations of the fusion protein produced by plant. The stability of the AHP5-GFP sample was examined; the complex was found to be unstable with GFP being released. The GFP release was not affected by either a long-term storage at -80 and -20 C or the addition of one of the inhibitors (EDTA, PMSF). These results were confirmed by the western blotting. The phosphorylation of the sample AHP5-GFP in vitro is under investigation. Gel filtration was used to obtain mass fractions for better understanding electrophoregrams. The mass fractions were investigated by CE-LIF and Western blotting-LIF and Western blotting.
Anotace česky
Ke studiu protein AHP5 fúzovaného s GFP byla použita metoda CE-LIF s budícím zdrojem laserovou diodou 405 nm. Fúzní protein AHP5-GFP byl exprimován v E.Coli a byl použit k optimalizaci metody, prototože přirozený výskyt tohoto protein je v rostlinách ve velmi nízkých koncetracích. AHP5-GFP je nestabilní a dochází k uvolňování GFP, tato skutečnost není ovlivněna teplotou skladováním (-20 a -80 C) ani přídavkem inhibitorů (EDTA, PMFS). Výsledky byly potvrzeny pomocí western blottingu. Fosforylace vzorku AHP5-GFP in vitro je nadále zkoumána. Pro lepší interpretaci elektroforegramů byl vzorek podroben gelové filtraci, kde byly získány hmotnostní frakce Ty byly zkoumány metodou CE-LIF a western blottingem
Návaznosti
ED1.1.00/02.0068, projekt VaVNázev: CEITEC - central european institute of technology
GA203/09/1025, projekt VaVNázev: Multidetekční platforma pro mikrokolonové separace proteinů a peptidů
Investor: Grantová agentura ČR, Multidetekční platforma pro mikrokolonové separace proteinů a peptidů
MSM0021622415, záměrNázev: Molekulární podstata buněčných a tkáňových regulací
Investor: Ministerstvo školství, mládeže a tělovýchovy ČR, Molekulární podstata buněčných a tkáňových regulací
VytisknoutZobrazeno: 16. 4. 2024 19:59