J 2011

CD133 expression and identification of CD133/nestin positive cells in rhabdomyosarcomas and rhabdomyosarcoma cell lines

ŠÁNA, Jiří, Iva ZAMBO, Jan ŠKODA, Jakub NERADIL, Petr CHLAPEK et. al.

Basic information

Original name

CD133 expression and identification of CD133/nestin positive cells in rhabdomyosarcomas and rhabdomyosarcoma cell lines

Authors

ŠÁNA, Jiří (203 Czech Republic, belonging to the institution), Iva ZAMBO (203 Czech Republic, belonging to the institution), Jan ŠKODA (203 Czech Republic, belonging to the institution), Jakub NERADIL (203 Czech Republic, belonging to the institution), Petr CHLAPEK (203 Czech Republic, belonging to the institution), Markéta HERMANOVÁ (203 Czech Republic, belonging to the institution), Peter MÚDRY (203 Czech Republic, belonging to the institution), Alzbeta VASIKOVA (203 Czech Republic), Karel ZITTERBART (203 Czech Republic, belonging to the institution), Aleš HAMPL (203 Czech Republic, belonging to the institution), Jaroslav ŠTĚRBA (203 Czech Republic, belonging to the institution) and Renata VESELSKÁ (203 Czech Republic, guarantor, belonging to the institution)

Edition

Analytical Cellular Pathology-Cellular Oncology, 2011, 2210-7177

Other information

Language

English

Type of outcome

Článek v odborném periodiku

Field of Study

Genetics and molecular biology

Country of publisher

Netherlands

Confidentiality degree

není předmětem státního či obchodního tajemství

Impact factor

Impact factor: 0.917

RIV identification code

RIV/00216224:14310/11:00050456

Organization unit

Faculty of Science

UT WoS

000298742900002

Keywords in English

Rhabdomyosarcoma; CD133; nestin; cancer stem cells; stem cell related markers

Tags

Tags

International impact, Reviewed
Změněno: 1/8/2013 13:44, Ing. Zdeňka Rašková

Abstract

V originále

Co-expression of CD133, cell surface glycoprotein, and nestin, an intermediate filament protein, was determined to be a marker of neural stem cells and of cancer stem cells in neurogenic tumors. Methods: We examined the expression of CD133 and nestin in ten tumor tissue samples taken from patients with rhabdomyosarcomas and in five rhabdomyosarcoma cell lines. Immunohistochemistry and immunofluorescence were used to examine FFPE tumor tissue samples. Cell lines were analyzed by immunofluorescence, immunoblotting, flow cytometry, and RT-PCR. Functional assays (clonogenic in vitro assay and tumorigenic in vivo assay) were also performed using these cell lines. Results: CD133 and nestin were detected in all 10 tumor tissue samples and in all 5 cell lines; however, the frequency of CD133+, Nes+, and CD133+/Nes+ cells, as well as the intensity of fluorescence varied in individual samples or cell lines. The expression of CD133 and nestin was subsequently confirmed in all cell lines by immunoblotting. Furthermore, we observed an increasing expression of CD133 in relation to the cultivation. All cell lines were positive for Oct3/4 and nucleostemin; NSTS-11 cells were also able to form xenograft tumors in mice. Conclusion: Our results represent the first evidence of CD133 expression in rhabdomyosarcoma tissue and in rhabdomyosarcoma cell lines. In addition, the co-expression of CD133 and nestin as well as results of the functional assays suggest a possible presence of cancer cells with a stem-like phenotype in these tumors.

In Czech

Souvislosti: Co exprese CD133, buněčného povrchu glykoprotein a nestinu, střední vlákno proteinu, byla stanovena na marker nervových kmenových buněk a buněk nádorových kmenových v neurogenních nádorů. Metodika: Vyšetřili jsme expresi CD133 a nestinu v deseti nádorových tkání odebraných vzorků od pacientů s rhabdomyosarcomas a v pěti řadách rabdomyosarkom buněk. Imunohistochemie a imunofluorescence byly použity zkoumat FFPE nádoru vzorky tkáně. Buněčné linie byly analyzovány pomocí imunofluorescence, imunoblotingu, průtokové cytometrie a RT-PCR. Funkční testy odst. clonogenic v testu in vitro a in vivo tumorigenního) byly provedeny i pomocí těchto buněčných linií. Výsledky: CD133 a nestinu byly zjištěny ve všech 10 nádoru vzorky tkáně a za všech 5 buněčných linií, nicméně frekvence CD133 +, Nes + a CD133 + / Nes + buněk, stejně jako intenzita fluorescence lišil v jednotlivých vzorcích nebo buněčných linií.Vyjádření CD133 a nestinu byla následně potvrzena ve všech buněčných linií imunoblotem. Kromě toho jsme zaznamenali rostoucí výraz CD133 ve vztahu k pěstování. Všechny buněčné linie byly pozitivní na Oct3 / 4 a nucleostemin, NSTS-11 buňky byly také schopné tvořit xenograft nádory u myší. Závěr: Naše výsledky představují první důkaz CD133 projevu v rabdomyosarkom tkáni a ve frontách rabdomyosarkom buněk. Kromě toho, co-výraz CD133 a nestinu, stejně jako výsledky funkčních testů naznačují možnou přítomnost rakovinných buněk s kmenových jako fenotypu v těchto nádorů. Vrátit úpravy

Links

GD204/08/H054, research and development project
Name: Molekulární mechanismy proliferace a diferenciace buněk
Investor: Czech Science Foundation, Molecular mechanisms of the cell proliferation and differentiation
MSM0021622415, plan (intention)
Name: Molekulární podstata buněčných a tkáňových regulací
Investor: Ministry of Education, Youth and Sports of the CR, Molecular basis of cell and tissue regulations
MSM0021622430, plan (intention)
Name: Funkční a molekulární charakteristiky nádorových a normálních kmenových buněk - identifikace cílů pro nová terapeutika a terapeutické strategie
Investor: Ministry of Education, Youth and Sports of the CR, Functional and molecular characteristics of cancer and normal stem cells - identification of targets for novel therapeutics and therapeutic strategies
MUNI/A/0091/2009, interní kód MU
Name: Imunocytochemická chrakterizace nově derivovaných sarkomových buněčných linií
Investor: Masaryk University, Category A - centralized resources
MUNI/A/0950/2010, interní kód MU
Name: Metronomická léčba v dětské onkologii
Investor: Masaryk University, Category A
MUNI/A/1012/2009, interní kód MU
Name: Optimalizace diagnostiky a terapie maligních chorob a komplikací, které tyto maligní nemoci provázejí, s využitím nových molekulárně biologických metod.
Investor: Masaryk University, Category A
NR9125, research and development project
Name: Diagnostický a prediktivní význam molekulárně cytogenetických markerů u embryonálních nádorů dětského věku.
Investor: Ministry of Health of the CR