CD133 expression and identification of CD133/nestin positive cells in rhabdomyosarcomas and rhabdomyosarcoma cell lines

ŠÁNA, Jiří, Iva ZAMBO, Jan ŠKODA, Jakub NERADIL, Petr CHLAPEK, Markéta HERMANOVÁ, Peter MÚDRY, Alzbeta VASIKOVA, Karel ZITTERBART, Aleš HAMPL, Jaroslav ŠTĚRBA and Renata VESELSKÁ. CD133 expression and identification of CD133/nestin positive cells in rhabdomyosarcomas and rhabdomyosarcoma cell lines. Analytical Cellular Pathology-Cellular Oncology. 2011, vol. 34, No 6, p. 303–318. ISSN 2210-7177. Available from: https://dx.doi.org/10.3233/ACP-2011-0018.

Basic information

• Original name: CD133 expression and identification of CD133/nestin positive cells in rhabdomyosarcomas and rhabdomyosarcoma cell lines
• Authors: ŠÁNA, Jiří (203 Czech Republic, belonging to the institution), Iva ZAMBO (203 Czech Republic, belonging to the institution), Jan ŠKODA (203 Czech Republic, belonging to the institution), Jakub NERADIL (203 Czech Republic, belonging to the institution), Petr CHLAPEK (203 Czech Republic, belonging to the institution), Markéta HERMANOVÁ (203 Czech Republic, belonging to the institution), Peter MÚDRY (203 Czech Republic, belonging to the institution), Alzbeta VASIKOVA (203 Czech Republic), Karel ZITTERBART (203 Czech Republic, belonging to the institution), Aleš HAMPL (203 Czech Republic, belonging to the institution), Jaroslav ŠTĚRBA (203 Czech Republic, belonging to the institution) and Renata VESELSKÁ (203 Czech Republic, guarantor, belonging to the institution).
• Edition: Analytical Cellular Pathology-Cellular Oncology, 2011, 2210-7177.

Other information

• Original language: English
• Type of outcome: Article in a journal
• Field of Study: Genetics and molecular biology
• Country of publisher: Netherlands
• Confidentiality degree: is not subject to a state or trade secret
• Impact factor: Impact factor: 0.917
• RIV identification code: RIV/00216224:14310/11:00050456
• Organization unit: Faculty of Science
• Doi: http://dx.doi.org/10.3233/ACP-2011-0018
• UT WoS: 000298742900002
• Keywords in English: Rhabdomyosarcoma; CD133; nestin; cancer stem cells; stem cell related markers
• Tags: AKR, rivok
• Tags: International impact, Reviewed

Abstract

Co-expression of CD133, cell surface glycoprotein, and nestin, an intermediate filament protein, was determined to be a marker of neural stem cells and of cancer stem cells in neurogenic tumors. Methods: We examined the expression of CD133 and nestin in ten tumor tissue samples taken from patients with rhabdomyosarcomas and in five rhabdomyosarcoma cell lines. Immunohistochemistry and immunofluorescence were used to examine FFPE tumor tissue samples. Cell lines were analyzed by immunofluorescence, immunoblotting, flow cytometry, and RT-PCR. Functional assays (clonogenic in vitro assay and tumorigenic in vivo assay) were also performed using these cell lines. Results: CD133 and nestin were detected in all 10 tumor tissue samples and in all 5 cell lines; however, the frequency of CD133+, Nes+, and CD133+/Nes+ cells, as well as the intensity of fluorescence varied in individual samples or cell lines. The expression of CD133 and nestin was subsequently confirmed in all cell lines by immunoblotting. Furthermore, we observed an increasing expression of CD133 in relation to the cultivation. All cell lines were positive for Oct3/4 and nucleostemin; NSTS-11 cells were also able to form xenograft tumors in mice. Conclusion: Our results represent the first evidence of CD133 expression in rhabdomyosarcoma tissue and in rhabdomyosarcoma cell lines. In addition, the co-expression of CD133 and nestin as well as results of the functional assays suggest a possible presence of cancer cells with a stem-like phenotype in these tumors.

Abstract (in Czech)

Souvislosti: Co exprese CD133, buněčného povrchu glykoprotein a nestinu, střední vlákno proteinu, byla stanovena na marker nervových kmenových buněk a buněk nádorových kmenových v neurogenních nádorů. Metodika: Vyšetřili jsme expresi CD133 a nestinu v deseti nádorových tkání odebraných vzorků od pacientů s rhabdomyosarcomas a v pěti řadách rabdomyosarkom buněk. Imunohistochemie a imunofluorescence byly použity zkoumat FFPE nádoru vzorky tkáně. Buněčné linie byly analyzovány pomocí imunofluorescence, imunoblotingu, průtokové cytometrie a RT-PCR. Funkční testy odst. clonogenic v testu in vitro a in vivo tumorigenního) byly provedeny i pomocí těchto buněčných linií. Výsledky: CD133 a nestinu byly zjištěny ve všech 10 nádoru vzorky tkáně a za všech 5 buněčných linií, nicméně frekvence CD133 +, Nes + a CD133 + / Nes + buněk, stejně jako intenzita fluorescence lišil v jednotlivých vzorcích nebo buněčných linií.Vyjádření CD133 a nestinu byla následně potvrzena ve všech buněčných linií imunoblotem. Kromě toho jsme zaznamenali rostoucí výraz CD133 ve vztahu k pěstování. Všechny buněčné linie byly pozitivní na Oct3 / 4 a nucleostemin, NSTS-11 buňky byly také schopné tvořit xenograft nádory u myší. Závěr: Naše výsledky představují první důkaz CD133 projevu v rabdomyosarkom tkáni a ve frontách rabdomyosarkom buněk. Kromě toho, co-výraz CD133 a nestinu, stejně jako výsledky funkčních testů naznačují možnou přítomnost rakovinných buněk s kmenových jako fenotypu v těchto nádorů. Vrátit úpravy

Links

• GD204/08/H054, research and development project: Name: Molekulární mechanismy proliferace a diferenciace buněk

Investor: Czech Science Foundation, Molecular mechanisms of the cell proliferation and differentiation

• MSM0021622415, plan (intention): Name: Molekulární podstata buněčných a tkáňových regulací

Investor: Ministry of Education, Youth and Sports of the CR, Molecular basis of cell and tissue regulations

• MSM0021622430, plan (intention): Name: Funkční a molekulární charakteristiky nádorových a normálních kmenových buněk - identifikace cílů pro nová terapeutika a terapeutické strategie

Investor: Ministry of Education, Youth and Sports of the CR, Functional and molecular characteristics of cancer and normal stem cells - identification of targets for novel therapeutics and therapeutic strategies

• MUNI/A/0091/2009, interní kód MU: Name: Imunocytochemická chrakterizace nově derivovaných sarkomových buněčných linií

Investor: Masaryk University, Category A - centralized resources

• MUNI/A/0950/2010, interní kód MU: Name: Metronomická léčba v dětské onkologii

Investor: Masaryk University, Category A

• MUNI/A/1012/2009, interní kód MU: Name: Optimalizace diagnostiky a terapie maligních chorob a komplikací, které tyto maligní nemoci provázejí, s využitím nových molekulárně biologických metod.

Investor: Masaryk University, Category A

• NR9125, research and development project: Name: Diagnostický a prediktivní význam molekulárně cytogenetických markerů u embryonálních nádorů dětského věku.

Investor: Ministry of Health of the CR