CD133 expression and identification of CD133/nestin positive cells in rhabdomyosarcomas and rhabdomyosarcoma cell lines

ŠÁNA, Jiří, Iva ZAMBO, Jan ŠKODA, Jakub NERADIL, Petr CHLAPEK, Markéta HERMANOVÁ, Peter MÚDRY, Alzbeta VASIKOVA, Karel ZITTERBART, Aleš HAMPL, Jaroslav ŠTĚRBA a Renata VESELSKÁ. CD133 expression and identification of CD133/nestin positive cells in rhabdomyosarcomas and rhabdomyosarcoma cell lines. Analytical Cellular Pathology-Cellular Oncology. roč. 34, č. 6, s. 303–318. ISSN 2210-7177. doi:10.3233/ACP-2011-0018. 2011.

Základní údaje

• Originální název: CD133 expression and identification of CD133/nestin positive cells in rhabdomyosarcomas and rhabdomyosarcoma cell lines
• Autoři: ŠÁNA, Jiří (203 Česká republika, domácí), Iva ZAMBO (203 Česká republika, domácí), Jan ŠKODA (203 Česká republika, domácí), Jakub NERADIL (203 Česká republika, domácí), Petr CHLAPEK (203 Česká republika, domácí), Markéta HERMANOVÁ (203 Česká republika, domácí), Peter MÚDRY (203 Česká republika, domácí), Alzbeta VASIKOVA (203 Česká republika), Karel ZITTERBART (203 Česká republika, domácí), Aleš HAMPL (203 Česká republika, domácí), Jaroslav ŠTĚRBA (203 Česká republika, domácí) a Renata VESELSKÁ (203 Česká republika, garant, domácí).
• Vydání: Analytical Cellular Pathology-Cellular Oncology, 2011, 2210-7177.

Další údaje

• Originální jazyk: angličtina
• Typ výsledku: Článek v odborném periodiku
• Obor: Genetika a molekulární biologie
• Stát vydavatele: Nizozemské království
• Utajení: není předmětem státního či obchodního tajemství
• Impakt faktor: Impact factor: 0.917
• Kód RIV: RIV/00216224:14310/11:00050456
• Organizační jednotka: Přírodovědecká fakulta
• Doi: http://dx.doi.org/10.3233/ACP-2011-0018
• UT WoS: 000298742900002
• Klíčová slova anglicky: Rhabdomyosarcoma; CD133; nestin; cancer stem cells; stem cell related markers
• Štítky: AKR, rivok
• Příznaky: Mezinárodní význam, Recenzováno

Anotace

Co-expression of CD133, cell surface glycoprotein, and nestin, an intermediate filament protein, was determined to be a marker of neural stem cells and of cancer stem cells in neurogenic tumors. Methods: We examined the expression of CD133 and nestin in ten tumor tissue samples taken from patients with rhabdomyosarcomas and in five rhabdomyosarcoma cell lines. Immunohistochemistry and immunofluorescence were used to examine FFPE tumor tissue samples. Cell lines were analyzed by immunofluorescence, immunoblotting, flow cytometry, and RT-PCR. Functional assays (clonogenic in vitro assay and tumorigenic in vivo assay) were also performed using these cell lines. Results: CD133 and nestin were detected in all 10 tumor tissue samples and in all 5 cell lines; however, the frequency of CD133+, Nes+, and CD133+/Nes+ cells, as well as the intensity of fluorescence varied in individual samples or cell lines. The expression of CD133 and nestin was subsequently confirmed in all cell lines by immunoblotting. Furthermore, we observed an increasing expression of CD133 in relation to the cultivation. All cell lines were positive for Oct3/4 and nucleostemin; NSTS-11 cells were also able to form xenograft tumors in mice. Conclusion: Our results represent the first evidence of CD133 expression in rhabdomyosarcoma tissue and in rhabdomyosarcoma cell lines. In addition, the co-expression of CD133 and nestin as well as results of the functional assays suggest a possible presence of cancer cells with a stem-like phenotype in these tumors.

Anotace česky

Souvislosti: Co exprese CD133, buněčného povrchu glykoprotein a nestinu, střední vlákno proteinu, byla stanovena na marker nervových kmenových buněk a buněk nádorových kmenových v neurogenních nádorů. Metodika: Vyšetřili jsme expresi CD133 a nestinu v deseti nádorových tkání odebraných vzorků od pacientů s rhabdomyosarcomas a v pěti řadách rabdomyosarkom buněk. Imunohistochemie a imunofluorescence byly použity zkoumat FFPE nádoru vzorky tkáně. Buněčné linie byly analyzovány pomocí imunofluorescence, imunoblotingu, průtokové cytometrie a RT-PCR. Funkční testy odst. clonogenic v testu in vitro a in vivo tumorigenního) byly provedeny i pomocí těchto buněčných linií. Výsledky: CD133 a nestinu byly zjištěny ve všech 10 nádoru vzorky tkáně a za všech 5 buněčných linií, nicméně frekvence CD133 +, Nes + a CD133 + / Nes + buněk, stejně jako intenzita fluorescence lišil v jednotlivých vzorcích nebo buněčných linií.Vyjádření CD133 a nestinu byla následně potvrzena ve všech buněčných linií imunoblotem. Kromě toho jsme zaznamenali rostoucí výraz CD133 ve vztahu k pěstování. Všechny buněčné linie byly pozitivní na Oct3 / 4 a nucleostemin, NSTS-11 buňky byly také schopné tvořit xenograft nádory u myší. Závěr: Naše výsledky představují první důkaz CD133 projevu v rabdomyosarkom tkáni a ve frontách rabdomyosarkom buněk. Kromě toho, co-výraz CD133 a nestinu, stejně jako výsledky funkčních testů naznačují možnou přítomnost rakovinných buněk s kmenových jako fenotypu v těchto nádorů. Vrátit úpravy

Návaznosti

• GD204/08/H054, projekt VaV: Název: Molekulární mechanismy proliferace a diferenciace buněk

Investor: Grantová agentura ČR, Molekulární mechanismy proliferace a diferenciace buněk

• MSM0021622415, záměr: Název: Molekulární podstata buněčných a tkáňových regulací

Investor: Ministerstvo školství, mládeže a tělovýchovy ČR, Molekulární podstata buněčných a tkáňových regulací

• MSM0021622430, záměr: Název: Funkční a molekulární charakteristiky nádorových a normálních kmenových buněk - identifikace cílů pro nová terapeutika a terapeutické strategie

Investor: Ministerstvo školství, mládeže a tělovýchovy ČR, Funkční a molekulární charakteristiky nádorových a normálních kmenových buněk - identifikace cílů pro nová terapeutika a terapeutické strategie

• MUNI/A/0091/2009, interní kód MU: Název: Imunocytochemická chrakterizace nově derivovaných sarkomových buněčných linií

Investor: Masarykova univerzita, Imunocytochemická chrakterizace nově derivovaných sarkomových buněčných linií, Kat. A - Podpora vynikajících diplomových prací v oborech zdravotnictví, přírodovědy a informatiky - centralizované prostředky

• MUNI/A/0950/2010, interní kód MU: Název: Metronomická léčba v dětské onkologii

Investor: Masarykova univerzita, Metronomická léčba v dětské onkologii, DO R. 2020_Kategorie A - Specifický výzkum - Studentské výzkumné projekty

• MUNI/A/1012/2009, interní kód MU: Název: Optimalizace diagnostiky a terapie maligních chorob a komplikací, které tyto maligní nemoci provázejí, s využitím nových molekulárně biologických metod.

Investor: Masarykova univerzita, Optimalizace diagnostiky a terapie maligních chorob a komplikací, které tyto maligní nemoci provázejí, s využitím nových molekulárně biologických metod., DO R. 2020_Kategorie A - Specifický výzkum - Studentské výzkumné projekty

• NR9125, projekt VaV: Název: Diagnostický a prediktivní význam molekulárně cytogenetických markerů u embryonálních nádorů dětského věku.

Investor: Ministerstvo zdravotnictví ČR, Diagnostický a prediktivní význam molekulárně cytogenetických markerů u embryonálních nádorů dětského věku