J 2012

Determination of eight polycyclic aromatic hydrocarbons and in pea plants (Pisum sativum L.) extracts by high performance liquid chromatography with electrochemical detection

ZÍTKA, Ondřej, Petr BABULA, Jiří SOCHOR, Marie KUMMEROVÁ, Olga KRYŠTOFOVÁ et. al.

Basic information

Original name

Determination of eight polycyclic aromatic hydrocarbons and in pea plants (Pisum sativum L.) extracts by high performance liquid chromatography with electrochemical detection

Name in Czech

Určení osmi polycyklických aromatických uhlovodíků v extraktech hrachu (Pisum sativum) pomocí vysoce účinné kapalinové chromatografie s elektrochemickou detekcí

Authors

ZÍTKA, Ondřej (203 Czech Republic), Petr BABULA (203 Czech Republic, guarantor), Jiří SOCHOR (203 Czech Republic), Marie KUMMEROVÁ (203 Czech Republic, belonging to the institution), Olga KRYŠTOFOVÁ (203 Czech Republic), Vojtěch ADAM (203 Czech Republic), Ladislav HAVEL (203 Czech Republic), Miroslava BEKLOVÁ (203 Czech Republic), Jaromír HUBÁLEK (203 Czech Republic) and René KIZEK (203 Czech Republic)

Edition

International Journal of Electrochemical Science, Belgrade, ESG, 2012, 1452-3981

Other information

Language

English

Type of outcome

Článek v odborném periodiku

Field of Study

30105 Physiology

Country of publisher

Serbia

Confidentiality degree

není předmětem státního či obchodního tajemství

Impact factor

Impact factor: 3.729 in 2011

RIV identification code

RIV/00216224:14310/12:00057259

Organization unit

Faculty of Science

UT WoS

000302730000002

Keywords (in Czech)

polycyklické aromatické uhlovodíky; vysoce účinná kapalinová chromatografie s UV a elektrochemickou detekcí; fluoranthen; hrách; Pisum sativum;

Keywords in English

Polycyclic aromatic hydrocarbons; high performance liquid chromatography with UV and electrochemical detection; fluoranthene; pea plants; Pisum sativum;

Tags

Tags

International impact, Reviewed
Změněno: 9/4/2013 19:13, Ing. Andrea Mikešková

Abstract

V originále

In the field of plant physiology, knowledge about polycyclic aromatic hydrocarbons (PAHs), mechanisms of actions are still missing and are limited despite the fact that induction of oxidative stress by several PAHs has been demonstrated. Primarily, high performance liquid chromatography coupled with UV detector and high performance liquid chromatography coupled with electrochemical detector were optimized for detection and quantification of the following PAHs as fluoranthene, pyrene, benzo[a]pyrene, naphthalene, benzo[a]antracene, methylanthracene, triphenylene and coronene. The optimized conditions were as follows: mobile phase - A: acetic acid (50 mM) and B: methanol (100 %). Compounds were eluted by linearly increasing gradient: 0 - 6 min (70 % B), 6 - 10 min (100 % B), 10 - 13 min (100 % B), 13 - 14 min (70 % B), 14 - 20 min (70 % B). Detection was performed at 275 nm (UV detector) and at 900 mV (electrochemical detector). One analysis lasted less than 20 minutes. Detection limits were estimated as 3 S/N down to subunits of uM for HPLC-ED and down to units of uM for HPLC-UV. It clearly follows from the results obtained that HPLC-ED has for more than one order of magnitude lower detection limits compared to HPLC-UV. It can be assumed that this difference would be higher, i.e. electrochemical detector could be more sensitive, if mobile phase with lower content of organic solvents would be used. Based on the above mentioned results, HPLC-ED was used in the following experiments. To test the applicability of our method, pea plants (Pisum sativum L. cv. Zazrak) were treated with fluoranthene (FLT) in the concentrations 0, 0.1, 1.0 and 5.0 mg/l and their tissues analysed to determine applied PAHs. Optimised HPLC method enabled determination of fluoranthene transport into different plant organs - roots, stems and leaves. Hydroponically cultivated pea plants also proved as suitable model for monitoring of effect of fluoranthene on uptake and transport of important elements.

In Czech

V oblasti rostlinné fyziologie poznatky o polycycklických aromatických uhlovodících (PAHs) a jejich účinku stále chybějí i přes to, že byla prokázána indukce oxidativního stresu různými PAHs. Vysoce účinná kapalinová chromatografie spojená s UV detektorem a s elektrochemickým detektorem byla optimalizována pro detekci a kvantifikaci následujících PAHs jako fluoranthen, pyren, benzo[a]pyren, naphthalen, benzo[a]antracen, methylanthracen, triphenylen and koronen. Optimalizované podmínky byly následující: mobilní fáze - A: kys. octová (50 mM) a B: methanol (100 %). Látky byly vymývány lineárně rostoucím gradientem : 0 -> 0 - 6 min (70 % B), 6 - 10 min (100 % B), 10 - 13 min (100 % B), 13 - 14 min (70 % B), 14 - 20 min (70 % B). Detekce probíhala při 275 nm (UV detektor) a při 900 mV (elektrochemický detektor). Jedna analýza trvala méně než 20 minut. Detekční limity byly určeny jako trojnásobek poměru Signál/Šum pod desetiny uM pro HPLC-ED and pod jednotky uM pro HPLC-UV. To odpovídá zjištění, že HPLC-ED má až o řád nižší detekční limity než HPLC-UV. Tento rozdíl by mohl být větší, tj. elektrochemický detektor by mohl být citlivější, kdyby byla použita mobilní fáze s nižším podílem organických rozpouštědel. S ohledem na předchozí experimenty bylo zvoleno HPLC-ED pro následující pokusy. Pro test použitelnosti naší metody byly rostliny hrachu (Pisum sativum, cv. Zázrak) vystaveny fluoranthenu v koncentracích 0, 0.1, 1.0 a 5.0 mg/l a jejich pletiva byla analyzována na obsah PAHs. Optimalizovaná HPLC metoda umožnila prozkoumání transportu fluoranthenu do různých orgánů - kořenů, stonku a listů. Hydroponicky pěstovaný hrách se prokázal jako vhodný model pro sledování vlivu fluoranthenu na příjem a transport fyziologicky klíčových prvků jako je vápník, měď, železo a zinek. Byly zjištěny významné rozdíly mezi kontrolními a zatíženými rostlinami, nicméně role těchto prvků v odpovědi na zatížení fluoranthenem by měla být dále zkoumána.

Links

GA522/09/0239, research and development project
Name: Buněčné a orgánové odpovědi rostlin na polycyklický aromatický uhlovodík
Investor: Czech Science Foundation