Determination of sarcosine as a potential tumour marker by liquid chromatography with coulometric detection

ZÍTKA, Ondřej, Natalia Vladimirovna CERNEI, Michal MASAŘÍK, Jaromír GUMULEC, Vojtěch ADAM, Jan HUBÁLEK, Aleš HORNA and René KIZEK. Determination of sarcosine as a potential tumour marker by liquid chromatography with coulometric detection. In XXI. International Symposium on Bioelectrochemistry and Bioenergetics. 2011. ISBN 978-83-62139-23-1.

Basic information

• Original name: Determination of sarcosine as a potential tumour marker by liquid chromatography with coulometric detection
• Name in Czech: Stanovení sarcosinu jako potenciálního nádorového markera v kapalinové chromatografie s coulometrickou detekcí
• Authors: ZÍTKA, Ondřej, Natalia Vladimirovna CERNEI, Michal MASAŘÍK, Jaromír GUMULEC, Vojtěch ADAM, Jan HUBÁLEK, Aleš HORNA and René KIZEK.
• Edition: XXI. International Symposium on Bioelectrochemistry and Bioenergetics, 2011.

Other information

• Original language: English
• Type of outcome: Conference abstract
• Field of Study: 30200 3.2 Clinical medicine
• Country of publisher: Czech Republic
• Confidentiality degree: is not subject to a state or trade secret
• Organization unit: Faculty of Medicine
• ISBN: 978-83-62139-23-1
• Keywords in English: sarcosine, liquid chromatography, coulometric detections

Abstract

Sarcosine is naturally occurring non-toxic amino acid soluble in water. Sarcosine originates in liver and kidneys as intermediate of choline metabolism and newly can be considered as a urine-marker of early stages of tumours. The aim of this study was to suggest fast and rapid method to determine sarcosine in human urine. Primarily, we optimized a chromatographic method which included a reversed phase chromatographic column (C18) and proper mobile phases. As non-polar component of mobile phase we used methanol and we decided to use trifluoroacetic acid (80 mM) as ion pairing agent with regards on polar character of sarcosine molecule. Thus we were able to separate sarcosine (RT: 4.72 min) from other molecules as uric acid and others mainly occurring polar matters in urine. Identification and determination was done by spiking and by method of standard addition of sarcosine to the sample of urine. We were able to determine ultra low sarcosine concentrations as well because we used four-channel coulometric electrochemical detector CoulArray (the potential of 900 mV). Limit of detection of this method was around 1 pg/ml and time of one analysis was 30 minutes.

Abstract (in Czech)

Sarcosine je přirozeně se vyskytující netoxická aminokyselina rozpustné ve vodě. Sarcosine vzniká v játrech a ledvinách jako meziprodukt metabolismu cholinu a nově lze považovat marker moči za stadium častých nádorů. Cílem této studie bylo navrhnout rychle a rychlou metodu pro stanovení sarcosinu v lidské moči. V první řadě je optimalizována chromatografie, která zahrnovala reverzní fází chromatografické kolony (C18) a vlastní mobilní fáze. Jako nepolární složky mobilní fáze jsme použili methanol a rozhodli jsme se použít kyselinu trifluoroctovou (80 mm) jako agent iontového párování s ohledem na polární charakter molekuly sarcosinu. A tak jsme byli schopni oddělit sarcosine (RT: 4,72 min) od jiných molekul, jako je kyselina močová a další polární oblasti vyskytující se hlavně v moči. Identifikace a stanovení se provede smísením a metodou standardního přídavku sarcosinu do vzorku moči. Byli jsme schopni dobře určit sarcosin ve velmi nízkých koncentracích, protože jsme použili čtyřkanálový coulometrický elektrochemický detektor CoulArray (potenciál 900 mV). Mez detekce této metody je přibližně 1 pg / ml a doba jedné analýzy je 30 minut.