ABSTRAKT
Úvod. Onemocnění centrální nervové soustavy představují jednu z
největších zátěží
současného zdravotnictví a jejich význam s ohledem na
prodlužující se délku života neustále
roste. Duševní poruchy a neurodegenerativní onemocnění budou i
nadále představovat stále
větší socioekonomický problém. Přes enormní úsilí a množství
dostupných léčiv stále
významná část nemocných neodpovídá na farmakoterapii optimálně.
Kromě vývoje nových
léčiv je nutné optimalizovat léčbu stávajícími léčivy. Cílem
této práce byl vývoj metod
s potenciálem optimalizovat léčbu psychofarmaky, resp. sledovat
metabolickou aktivitu
cytochromů P450 v preklinickém výzkumu. Dalšími cíli pak bylo
ověření těchto metod
v klinickém/preklinickém experimentu.
Metody. Hlavními použitými výzkumnými metodami bylo sledování
rychlosti biotransformace
selektivních markerů metabolické aktivity forem cytochromu P450
a pro stanovení těchto
selektivních markerů a jejich metabolitů potom metody
kapalinové chromatografie (HPLC) ve
spojení s UV/DAD detekcí.
Výsledky. Pro sledování fenotypu CYP1A2 v klinické praxi byla
vyvinuta nová, rychlá, citlivá
a reprodukovatelná analytická metoda pro stanovení koncentrací
kofeinu a jeho 7 metabolitů
v lidské moči a slinách. Tato metoda je snadno proveditelná,
neinvazivní a nevyžaduje speciální
analytickou instrumentaci. Její využití bylo ověřeno v pilotním
projektu podání kofeinu
zdravým dobrovolníkům. Dále byla vyvinuta inovativní analytická
metoda využívající
stanovení koncentrací testotesteronu a jeho pěti
hydroxylovaných metabolitů ke stanovení
metabolické aktivity různých enzymů CYP v preklinickém
experimentu. Metoda byla ověřena
ve studii, jejímž cílem bylo objasnit, zda systémová aplikace
safranalu, bioaktivní složky
izolované z Crocus sativus L., může ovlivnit metabolickou
aktivitu CYP3A, CYP2C11,
CYP2B a CYP2A v potkaních jaterních mikrozomech (RLM).
Závěr. Sledování fenotypu cytochromů P450 pomáhá
individualizovat farmakoterapii
v psychiatrii a stejně tak patří stanovení metabolické aktivity
k základním postupům sledování
farmakokinetických lékových interakcí. Metody vyvinuté v rámci
této práce byly ověřeny
v klinickém, resp. preklinickém experimentu. Metoda využívající
kofein jako modelový
substrát může být v klinické praxi vhodnou alternativou ke
stanovení metabolické aktivity
CYP1A2 pomocí měření metabolického poměru kofeinu z moči.
Stanovení fenotypu CYP1A2
u člověka je možné využít pro optimalizaci farmakoterapie
léčivy, která jsou významně
biotransformována tímto enzymem - z psychofarmak jde např. o
klozapin, olanzapin, asenapin,
agomelatin, fluvoxamin a duloxetin. Metodu využívající
testosteron jako modelový substrát
lze využít např. při in vitro inkubacích s potkaními jaterními
mikrozomy, ke studiu vlivu
různých faktorů na metabolickou aktivitu některých enzymů CYP.