Tato bakalářská práce řeší problematiku testování látek způsobujících testikulární toxicitu. Tyto látky narušují mužský reprodukční systém, což může vést až k neplodnosti. V teoretické části práce se porovnává tradiční přístup využívající zvířata (metody in vivo) s novým přístupem zaměřeným na tzv. alternativní in vitro modely a metody, ať již validované, v procesu validace nebo teprve ve vývoji. In vitro modely umožňují studovat účinky testovaných látek na buňky či tkáně a lépe porozumět složitým procesům odehrávajícím se ve varlatech. Je třeba pamatovat na to, že in vitro model postihuje pouze část všech interakcí a procesů odehrávajících se v in vivo prostředí varlat, proto nemůže nikdy jeden in vitro model či metoda nahradit testování na zvířatech. Stěžejní rolí budou ovšem hrát v tzv. stupňovitém schématu testování spolu s metodami in silico, ex vivo a zatím i in vivo. V práci jsou uvedeny dostupné in vitro modely ke studiu testikulární toxicity a v přehledné formě jsou shrnuty jejich výhody, nevýhody a použití. Účelem experimentální části bylo podílet se na optimalizaci dvou pokročilých in vitro testikulárních modelů. Prvním byl in vitro model ko-kultivace Sertoliho TM4 a Leydigových TM3 buněk, umožňující hlouběji zkoumat parakrinní komunikaci mezi těmito důležitými typy somatických testikulárních buněk. Druhý cíl praktické části byl zaměřen na tvorbu multicelulárních sféroidů tvořených Leydigovými TM3 buňkami.