Lékařská fakulto Masarykova univerzita
Biologický ústav Masarykova univerzita
Lékařská fakulta
Biologický ústav
625 00 Bmo
Kamenice 5
Tel: +420549497496 Fax: +420549491327 Web: http://www.med.muni.cz/biologie Email: dsmajs@med.muni.cz
v Brně dne: 1. 11. 2013
Oponentský posudek na disertační práci Mgr. Marty Elsheimer Matulové „Study of host-pathogen interactions
on the chicken-So/mone//o model"
Disertační práce Mgr. Marty Elsheimer Matulové se zabývá přípravou a testováním kmenů Salmonella
enterica sv. Enteritidis pro vakcinaci drůbeže. S. enterica sv. Enteritidis je totiž jedním z nejčastějších původců
gastroenteritid u lidí a zdrojem nákazy přitom nejčastěji bývá drůbeží maso a vejce. V České republice je ročně
hlášeno přibližně 10 000 případů infekce způsobené S. enterica. Různé deleční mutanty salmonel byly testovány
na jejich schopnost imunizovat drůbež a jejich efekt byl navzájem porovnán. Druhou zásadní částí disertační práce
bylo studium obecné odpovědi kuřat na infekci Salmonella enterica sv. Enteritidis. Podařilo se prokázat rozdíly
v průběhu imunitní reakce mezi nevakcinovanými a vakcinovanými kuřaty.
Autorka ve své práci používala řadu mikrobiologických, buněčně-biologických a molekulárně-biologických
technik zahrnujících kultivaci bakterií, experimentální model infekce S. enterica, transmisní elektronovou
mikroskopii, detekci hladin protilátek pomocí metody ELISA, třídění buněk pomocí průtokové cytometrie,
kvantitativní PCR, sekvenační analýzu transkriptomu, identifikaci a kvantifikaci proteinů hmotnostní spektrometrií
a dalších. Z uvedeného stručného výčtu experimentálních technik, které autorka použila při studiu dané tématiky,
je patrný mimořádně široký metodický záběr autorky. Přitom jde povětšinou o relativně složité experimentální
postupy, které vyžadují značnou laboratorní erudici a zkušenost.
Práce je členěna na úvodní kapitolu, která výstižně podává ucelený přehled studované problematiky, a
dále na cíle disertační práce, použitý materiál a metody, výsledky experimentální práce, diskusi výsledků a závěr.
Práce je dále doplněna o česky a anglicky psaný abstrakt, seznam použitých zkratek, seznam použité literatury a
přílohy. Délka a obsah jednotlivých kapitol jsou vyvážené. Práce je doplněna 6 publikovanými pracemi, na kterých
Biologický ústav - Lékařská fakulta - Masarykova univerzita
IČ 00216224
DIČ CZ00216224
Bankovní spojení: KB Brno-město
Č. ú. 85636621/0100
se autorka podílela a u kterých je vždy první autorkou.
Práce je z formálního hlediska zpracována s velkou pečlivostí a typografické chyby se téměř nevyskytují.
Kapitola výsledky a diskuse je značně kompaktní a je vidět, že autorka pečlivě vážila, co do těchto kapitol zařadit a
co už ne. Tato stručnost trochu komplikuje orientaci v textu, a to zejména pro čtenáře, který nepracuje na
podobné tématice. Uvedená úspornost kapitol má však svoje logické vysvětlení. Jak již bylo uvedeno, autorka
přikládá šest originálních publikací a je tedy zjevné, že takový rozsah odvedené práce nelze vtěsnat do omezeného
rozsahu disertační práce. Navíc je vždy možné nahlédnou do přiložených publikací.
K uvedené práci mám několik otázek:
1. Autorka popisuje CAMPs (cationic antimicrobial peptides) jako hydrofobní molekuly. Přitom jejich
pozitivní náboj (alespoň v části molekuly) je patrně podstatou jejich vazby na negativně nabitý povrch
bakteriálního obalu. Může autorka blíže osvětlit mechanismus účinku CAMPs?
2. Některé buňky hostitele rozpoznávají bakterie pomocí receptoru (např. pomocí Toll-like receptoru),
které vážou bakteriální makromolekulami komponenty. Genové polymorfismy v genech kódujících sdToll-like
receptory jsou často asociovány s odlišnou citlivostí hostitele k bakteriální infekci. Jsou známy polymorfismy u
kuřat asociované s vyšší citlivostí k infenci S. enterica sv. Enteritidis?
Závěr
Předložená práce vrchovatou měrou splňuje nároky kladené na disertační práci. Autorka publikovala
výsledky své práce v šesti renomovaných impaktovaných zahraničních časopisech, přičemž ve všech případech je
autorkou první. Jde přitom o časopisy známé náročným recenzním procesem a není tedy nejmenších pochyb o
kvalitě předkládaných výsledků. Současně je nutno ocenit mimořádnou experimentální a publikační výkonnost
autorky, která několikanásobně převyšuje nároky kladené na uchazeče o titul Ph.D. Rád tedy doporučuji, aby byl
Mgr. Martě Elsheimer Matulové, po úspěšné obhajobě a ve smyslu platných předpisů, udělen titul Ph.D.
doc. MUDr. David Šmajs, Ph.D.
Biologický ústav LF MU
Kamenice 5, budova A6
625 00 Brno
Tel.: 549 497 496
E-mail: dsmajs@med.muni.cz