MikroRNA (miRNA), řazené do skupiny krátkých nekódujících RNA, patří mezi významné regulátory jak fyziologických, tak i patofyziologických procesů. MiRNA hrají často klíčovou roli v procesech provázejících maligní transformaci, kde mohou fungovat jako onkogeny nebo nádorové supresory. Souvislost mezi změnou exprese některých miRNA a maligním fenotypem byla popsána i v případě kolorektálního karcinomu, který patří celosvětově mezi nejčastější nádorová onemocnění. Několik prací, které se zabývaly stanovením expresních profilů miRNA v nádorové tkáni, upozornily na miR-135b, jejíž exprese je v nádoru významně snížena v porovnání se zdravou střevní sliznicí. Cílené snížení exprese miR-135b v buňkách kolorektálního karcinomu by mohlo ovlivnit jejich maligní fenotyp. Diplomová práce bude zaměřena na získání stabilních buněčných linií odvozených od kolorektálního karcinomu se sníženou expresní hladinou miR-135b. Získané linie poslouží k dalšímu studiu funkce miR-135b. Cílem teoretické části diplomové práce bude orientace v problematice biotechnologických postupů cíleného vytváření mutací s orientací na metodiku CRISPR/Cas9 a pokroky v mutagenezi nekódujících RNA. Experimentální část práce bude obsahovat osvojení manipulace se stabilními buněčnými liniemi in vitro, dále osvojení postupů spojených s cíleným vnášením mutací a dalších molekulárně-biologických postupů, které budou následně použity k validaci a charakterizaci získaných mutantních monoklonálních buněčných linií.