V této diplomové práci se věnuji vlivu hypoxie na citrulinaci
histonu H3 u neutrofilních granulocytů. Neutrofily jsou buňky
nespecifické imunity a své efektorové funkce často vykonávají v
hypoxickém prostředí, jako je například ložisko zánětu.
Citrulinace histonů je významnou epigenetickou modifikací,
která se v nejvyšší míře projevuje u histonu H3. U neutrofilů
je citrulinace histonů spojována především s procesem NETózy,
která je významným obranným mechanismem neutrofilů. Pro studium
vlivu hypoxie byly izolované lidské neutrofily inkubovány s
DMOG (dimethyloxalylglycin), stabilizátorem HIF-α (hypoxia
inducible factor), čímž byly buňky uvedeny do hypoxického
režimu. Citrulinovaný histon H3 byl stanovován pomocí western
blotu, rovněž byla sledována i hladina ATP v neutrofilech. Z
výsledků vyplývá, že hypoxie indukovaná DMOG vyvolává u
neutrofilů citrulinaci histonu H3. Citrulinace byla
pozorovatelná již po dvouhodinové inkubaci, nejintenzivnější
byla při použití 2 mM DMOG. Dále se ukázalo, že intracelulární
koncentrace ATP zřejmě na míru citrulinace histonu H3 nemá
vliv, ovšem pro celkové objasnění mechanismu působení je třeba
další výzkum.