Sinice a sinicové vodní květy produkují biologicky aktivní
látky, které mohou mít ne-gativní vliv na lidské zdraví, ať už
při vodních rekreačních aktivitách nebo při požití
kontaminované vody. Tato expozice může u lidí vyvolat
podráždění kůže, očí, nevol-nosti, alergie a onemocnění
gastrointestinálního traktu. Součástí buněčné stěny sinic i
gramnegativních heterotrofních bakterií, které jsou významnou
součástí vodních květů, jsou lipopolysacharidy (LPS). Zatím je
však velmi málo známo o tom, jak jejich environmentální směsi,
ale i LPS samotných sinic přispívají k výše zmíněným
zdra-votním komplikacím.
Tato práce je zaměřena na studium prozánětlivých efektů LPS
izolovaných z vodních květů pocházejících z 19 rekreačních
vodních ploch v České republice. Ke studiu byla použita
kokultura diferencovaných Caco-2 buněk (enterocyty) a
mononukleárních leukocytů izolovaných z lidské periferní krve.
Byla sledována změna v produkci prozánětlivých cytokinů,
exprese proteinů těsných spojů a aktivace monocytů. Byl
prokázán prozánětlivý efekt LPS ze sinicových vodních květů s
dominujícím druhem Dolichospermum flos-aquae.
Druhým cílem práce bylo připravit klony buněk THP-1 bez exprese
funkčního Toll-like receptoru (TLR) 4 a 2, jejichž
experimentální použití přispěje k popsání mechanismu působení
sinicového LPS izolovaného z axenické laboratorní kultury
sinice Aphanizomenon flos-aquae PCC 7905. V rámci diplomové
práce se povedlo připravit 3 úspěšné THP-1TLR2-/- klony. Jejich
expozice studovanému LPS ukázala, že TLR-2 hraje velmi
významnou roli v jeho signalizaci.
Součástí této práce je i literární rešerše zabývající se
střevním epitelem, imunitním systémem střeva, buněčnými
kulturaci a v neposlední řadě sinicemi, lipopolysacharidem a
vodními květy.