Interleukin-1α (IL-1α) je prozánětlivý cytokin, který je
důležitý pro mezibuněčnou komuni-kaci, především imunitních
buněk. Je produkován téměř všemi typy buněk i za
homeostatic-kých podmínek, jeho hlavním zdrojem však jsou buňky
tvořící bariéry, jako jsou buňky epi-telové a endotelové. IL-1α
se může nacházet v jádře, cytoplazmě nebo na plazmatické
mem-bráně buňky. Prekurzor IL-1α může být štěpen několika
proteázami do jeho maturované formy a následně být uvolňován do
extracelulárního prostoru. Jeho hlavní role je iniciace a
řízení zánětu, ale podílí se na různých patologiích, včetně
různých autoimunitních onemoc-něních nebo rakoviny.
IL-1α může být exprimován samotnými nádorovými buňkami nebo
buňkami nádoro-vého mikroprostředí. V závislosti na konkrétním
typu nádoru a jeho kontextu vykazuje IL-1α jak pronádorové, tak
protinádorové vlastnosti. Nynější poznatky naznačují, že jeho
membrá-nová forma má schopnost aktivovat protinádorovou
imunitu, naopak jeho sekretovaná forma ve větším množství
podporuje nádorové zánětlivé prostředí a tumorigenezi. Aktivace
proti-nádorové imunitní odpovědi membránovou formou IL-1α byla
prozatím popsána u fibrosar-komu, hepatocelulárního karcinomu a
T-lymfomu. Nás zajímalo, zda tomu tak je i u karci-nomů prsu.
Hlavním cílem této diplomové práce bylo vytvoření modelu
karcinomu prsu se zvý-šenou expresí membránové formy IL-1α,
který by následně sloužil k in vivo experimentům. K tomuto
účelu byla použita mutageneze tří důležitých míst v cDNA IL-1α,
jejichž mutace by měla vyústit expresi IL-1α asociovaného s
membránou. To se nám nepodařilo dosáhnout, ale byl potvrzen
efekt mutace v jaderně lokalizačním signálu, který byl dále
testován ve vli-vu na fenotypové chování buněk, kde se ukázal
potenciální efekt na schopnost migrace bu-něk. Dále byl
povrchový IL-1α zkoumán na panelu lidských buněčných linií
karcinomu prsu, kde byla nalezena jedna linie, která má
zvýšenou expresi membránového IL-1α a ten reaguje na krátkodobé
zvýšení teploty.