J 2013

Hybrid detectors improved time-lapse confocal microscopy of PML and 53BP1 nuclear body co-localization in DNA lesions

FOLTÁNKOVÁ, Veronika, Pavel MATULA, Dmitry SOROKIN, Stanislav KOZUBEK, Eva BÁRTOVÁ et. al.

Základní údaje

Originální název

Hybrid detectors improved time-lapse confocal microscopy of PML and 53BP1 nuclear body co-localization in DNA lesions

Autoři

FOLTÁNKOVÁ, Veronika (203 Česká republika), Pavel MATULA (203 Česká republika, garant, domácí), Dmitry SOROKIN (643 Rusko, domácí), Stanislav KOZUBEK (203 Česká republika) a Eva BÁRTOVÁ (203 Česká republika)

Vydání

Microscopy and Microanalysis, Saarbrücken, Cambridge University Press, 2013, 1431-9276

Další údaje

Jazyk

angličtina

Typ výsledku

Článek v odborném periodiku

Obor

Genetika a molekulární biologie

Stát vydavatele

Německo

Utajení

není předmětem státního či obchodního tajemství

Odkazy

Impakt faktor

Impact factor: 2.161

Kód RIV

RIV/00216224:14330/13:00065961

Organizační jednotka

Fakulta informatiky

UT WoS

000316221500013

Klíčová slova anglicky

DNA damage;chromatin; 53BP1; PML bodies; hybrid detectors; confocal microscopy

Štítky

Příznaky

Mezinárodní význam, Recenzováno
Změněno: 30. 4. 2014 08:46, RNDr. Pavel Šmerk, Ph.D.

Anotace

V originále

We used hybrid detectors (HyDs) to monitor the trajectories and interactions of promyelocytic leukemia (GFP-PML) nuclear bodies (NBs) and mCherry-53BP1-positive DNA lesions. 53BP1 protein accumulates in NBs that occur spontaneously in the genome or in gamma-irradiationinduced foci. When we induced local DNA damage by ultraviolet irradiation, we also observed accumulation of 53BP1 proteins into discrete bodies, instead of the expected dispersed pattern. In comparison with photomultiplier tubes (PMTs), which are used for standard analysis by confocal laser scanning microscopy, HyDs significantly eliminated photobleaching of GFP and mCherry fluorochromes during image acquisition. The low laser intensities used for HyD-based confocal analysis enabled us to observe NBs for the longer time periods, necessary for studies of the trajectories and interactions of PML and 53BP1 NBs. To further characterize protein interactions, we used resonance scanning and a novel bioinformatics approach to register and analyze the movements of individual PML and 53BP1 NBs. The combination of improved HyD-based confocal microscopy with a tailored bioinformatics approach enabled us to reveal damage-specific properties of PML and 53BP1 NBs.

Návaznosti

GBP302/12/G157, projekt VaV
Název: Dynamika a organizace chromosomů během buněčného cyklu a při diferenciaci v normě a patologii
Investor: Grantová agentura ČR, Dynamika a organizace chromosomů během buněčného cyklu a při diferenciaci v normě a patologii