PROKOPOVÁ, Lucie, Jitka VINKLEROVÁ, Michal VINKLER and Pavel HYRŠL. Metodika sledování vrozené imunity ptáků (Methodology of birds innate immunity). In Zoologické dny. 2013. ISBN 978-80-87189-14-6.
Other formats:   BibTeX LaTeX RIS
Basic information
Original name Metodika sledování vrozené imunity ptáků
Name in Czech Metodika sledování vrozené imunity ptáků
Name (in English) Methodology of birds innate immunity
Authors PROKOPOVÁ, Lucie (203 Czech Republic, belonging to the institution), Jitka VINKLEROVÁ (203 Czech Republic), Michal VINKLER (203 Czech Republic) and Pavel HYRŠL (203 Czech Republic, guarantor, belonging to the institution).
Edition Zoologické dny, 2013.
Other information
Original language Czech
Type of outcome Conference abstract
Field of Study 30102 Immunology
Country of publisher Czech Republic
Confidentiality degree is not subject to a state or trade secret
RIV identification code RIV/00216224:14310/13:00067748
Organization unit Faculty of Science
ISBN 978-80-87189-14-6
Keywords (in Czech) ptáci; imunita; komplement; oxidační vzplanutí
Keywords in English birds; immunity; complement; oxidative burst
Changed by Changed by: doc. RNDr. Pavel Hyršl, Ph.D., učo 9982. Changed: 10/2/2013 17:52.
Abstract
Imunitní systém ptáků jakožto jeden ze základních homeostatických mechanismů organismu zahrnuje stejně jako u ostatních živočichů imunitu nespecifickou a specifickou. Předmětem našeho zájmu se staly mechanismy imunity nespecifické, které dále dělíme na složku humorální a buněčnou. Humorální složku zde představuje především komplementový systém, jehož antibakteriální aktivitu měříme pomocí geneticky modifikované bakterie Escherichia coli K12 emitující světlo. Princip metody je založen na měření kinetiky úbytku luminiscence v závislosti na baktericidních účincích komplementového systému, přičemž míra bakteriální luminiscence je úměrná jejich viabilitě. Jako další součást humorální složky můžeme jmenovat lysozym, hydrolytický enzym, jehož inhibiční aktivita je nejsilnější proti G+ bakteriím a jehož koncentraci lze stanovit pomocí radiální difúze. V rámci složky buněčné se naše pozornost zaměřila především na proces fagocytózy, během níž jsou uplatňovány dva typy mechanismů – na kyslíku závislé a nezávislé. Zatímco u většiny obratlovců je preferován mechanismus oxidativní, u ptáků je v důsledku absence myeloperoxidázy a katalázy heterofilů přednostně využíván mechanismus neoxidativní. Naše metoda měření produkce volných kyslíkových radikálů je založena na reakci citlivého luminoforu, konkrétně Pholasinu, jejímž výsledkem je luminiscenční signál úměrně závislý na aktivitě fagocytózy. Jako aktivátory byly zvoleny lipopolysacharidy pocházející z buněčných stěn gramnegativních bakterií Escherichia coli a Salmonella enterica. Pozorované reakce vykazovaly znatelně odlišné vlastnosti. Ty se týkaly jak rychlosti reakce, tak i její velikosti a průběhu. Pro optimalizace metod jsme použili krevní vzorky kura domácího (Gallus gallus f. domestica) a pro porovnání produkce kyslíkových radikálů fagocyty jsme odebírali krev 15 dní starých mláďat sýkor koňader (Parus major). Tato práce byla podpořena granty GAČR P506/12/2472 a P505/10/1871.
Abstract (in English)
Imunitní systém ptáků jakožto jeden ze základních homeostatických mechanismů organismu zahrnuje stejně jako u ostatních živočichů imunitu nespecifickou a specifickou. Předmětem našeho zájmu se staly mechanismy imunity nespecifické, které dále dělíme na složku humorální a buněčnou. Humorální složku zde představuje především komplementový systém, jehož antibakteriální aktivitu měříme pomocí geneticky modifikované bakterie Escherichia coli K12 emitující světlo. Princip metody je založen na měření kinetiky úbytku luminiscence v závislosti na baktericidních účincích komplementového systému, přičemž míra bakteriální luminiscence je úměrná jejich viabilitě. Jako další součást humorální složky můžeme jmenovat lysozym, hydrolytický enzym, jehož inhibiční aktivita je nejsilnější proti G+ bakteriím a jehož koncentraci lze stanovit pomocí radiální difúze. V rámci složky buněčné se naše pozornost zaměřila především na proces fagocytózy, během níž jsou uplatňovány dva typy mechanismů – na kyslíku závislé a nezávislé. Zatímco u většiny obratlovců je preferován mechanismus oxidativní, u ptáků je v důsledku absence myeloperoxidázy a katalázy heterofilů přednostně využíván mechanismus neoxidativní. Naše metoda měření produkce volných kyslíkových radikálů je založena na reakci citlivého luminoforu, konkrétně Pholasinu, jejímž výsledkem je luminiscenční signál úměrně závislý na aktivitě fagocytózy. Jako aktivátory byly zvoleny lipopolysacharidy pocházející z buněčných stěn gramnegativních bakterií Escherichia coli a Salmonella enterica. Pozorované reakce vykazovaly znatelně odlišné vlastnosti. Ty se týkaly jak rychlosti reakce, tak i její velikosti a průběhu. Pro optimalizace metod jsme použili krevní vzorky kura domácího (Gallus gallus f. domestica) a pro porovnání produkce kyslíkových radikálů fagocyty jsme odebírali krev 15 dní starých mláďat sýkor koňader (Parus major). Tato práce byla podpořena granty GAČR P506/12/2472 a P505/10/1871.
PrintDisplayed: 7/10/2024 05:40