J 2016

Differential Isotope Labeling of Glycopeptides for Accurate Determination of Differences in Site-Specific Glycosylation

PABST, Martin, Iva BENEŠOVÁ, Stephan R FAGERER, Mathias JACOBSEN, Klaus EYER et. al.

Základní údaje

Originální název

Differential Isotope Labeling of Glycopeptides for Accurate Determination of Differences in Site-Specific Glycosylation

Autoři

PABST, Martin (40 Rakousko), Iva BENEŠOVÁ (203 Česká republika, domácí), Stephan R FAGERER (276 Německo), Mathias JACOBSEN (756 Švýcarsko), Klaus EYER (756 Švýcarsko), Gregor SCHMIDT (756 Švýcarsko), Robert STEINHOFF (276 Německo), Jasmin KRISMER (756 Švýcarsko), Fabian WAHL (756 Švýcarsko), Jan PREISLER (203 Česká republika, garant, domácí) a Renato ZENOBI (756 Švýcarsko)

Vydání

Journal of Proteome Research, Washington, American Chemical Society, 2016, 1535-3893

Další údaje

Jazyk

angličtina

Typ výsledku

Článek v odborném periodiku

Obor

10406 Analytical chemistry

Stát vydavatele

Spojené státy

Utajení

není předmětem státního či obchodního tajemství

Impakt faktor

Impact factor: 4.268

Kód RIV

RIV/00216224:14310/16:00093930

Organizační jednotka

Přírodovědecká fakulta

UT WoS

000367706000026

Klíčová slova anglicky

glycopeptides; stable isotope labeling; IgG; MALDI MS; LC-ESI-MS

Štítky

Příznaky

Mezinárodní význam, Recenzováno
Změněno: 15. 2. 2018 22:03, prof. Mgr. Jan Preisler, Ph.D.

Anotace

V originále

We introduce a stable isotope labeling approach for glycopeptides that allows a specific glycosylation site in a protein to be quantitatively evaluated using mass spectrometry. Succinic anhydride is used to specifically label primary amino groups of the peptide portion of the glycopeptides. The heavy form ((D4C4)-C-13) provides an 8 Da mass increment over the light natural form ((H4C4)-C-12), allowing simultaneous analysis and direct comparison of two glycopeptide profiles in a single MS scan. We have optimized a protocol for an in-solution trypsin digestion, a one-pot labeling procedure, and a post-labeling solid-phase extraction to obtain purified and labeled glycopeptides. We provide the first demonstration of this approach by comparing IgGI Pc glycopeptides from polyclonal IgG samples with respect to their galactosylation and sialylation patterns using MALDI MS and LC-ESI-MS.

Návaznosti

ED1.1.00/02.0068, projekt VaV
Název: CEITEC - central european institute of technology
EE2.3.30.0009, projekt VaV
Název: Zaměstnáním čerstvých absolventů doktorského studia k vědecké excelenci