Capillary electrophoresis with fluorescence detection as a tool for the study of metabolites

CELÁ, Andrea, Aleš MÁDR a Zdeněk GLATZ. Capillary electrophoresis with fluorescence detection as a tool for the study of metabolites. In The Biomania Student Scientific Meeting 2017. 2017. ISBN 978-80-210-8737-8.

Základní údaje

• Originální název: Capillary electrophoresis with fluorescence detection as a tool for the study of metabolites
• Název česky: Kapilární elektroforéza s fluorescenční detekcí jako nástroj pro studium metabolitů
• Autoři: CELÁ, Andrea, Aleš MÁDR a Zdeněk GLATZ.
• Vydání: The Biomania Student Scientific Meeting 2017, 2017.

Další údaje

• Originální jazyk: angličtina
• Typ výsledku: Konferenční abstrakt
• Obor: 10600 1.6 Biological sciences
• Stát vydavatele: Česká republika
• Utajení: není předmětem státního či obchodního tajemství
• Organizační jednotka: Přírodovědecká fakulta
• ISBN: 978-80-210-8737-8
• Klíčová slova česky: kapilární elektroforéza, fluorescenční detekce, derivatizace v kapiláře, aminokyseliny, metabolomika
• Klíčová slova anglicky: capillary electrophoresis, fluorescence detection, on-capillary derivatization, amino acids, metabolomics

Anotace

Metabolomics is a scientific discipline focusing on the study of metabolome. Metabolome is the set of all metabolites in an organism. Among metabolites of great importance to living organisms belong amino acids. Their actual levels in biological fluids can reveal complex physiological state of an organism. However they exhibit low or no native fluorescence, derivatization is essential for their sensitive determination by fluorescence detection. Capillary electrophoresis offers derivatization within the capillary, where the inner space of the capillary is used at first for derivatization and then for separation. This approach can be fully automated and requires only minimum volume of sample and other reagents. This contribution deals with optimization of two methods for derivatization of amino acids with naphthalene 2,3 dicarboxaldehyde/ sodium cyanide, differing in mixing strategy of the reactants. Mixing by transverse diffusion of laminar flow profiles (TDLFP) and by electrophoretically mediated microanalysis (EMMA) were compared in terms of efficiency of the mixing, sensitivity, repeatability and applicability to various biological samples.

Anotace česky

Metabolomika je vědní disciplína zabývající se studiem metabolomu. Metabolom je soubor všech metabolitů daného organismu. K velmi významným metabolitům patří aminokyseliny. Jejich aktuální hladiny v tělních tekutinách odráží komplexní fyziologický stav organismu. Jelikož nevykazují nativní fluorescenci, je pro jejich citlivé stanovení pomocí fluorescenční detekce nutná jejich derivatizace. Kapilární elektroforéza umožňuje derivatizaci přímo v kapiláře, kde je vnitřní prostor kapiláry využit nejprve pro derivatizaci a poté pro separaci. Tento přístup je plně automatizovaný a má velmi malé nároky na objemy vzorku a ostatních reagencií. Předmětem tohoto příspěvku je optimalizace dvou metod pro derivatizaci aminokyselin pomocí naftalen-2,3-dikarboxaldehydu a kyanidu sodného, lišících se typem míchání reagencií v kapiláře. Míchání příčnou difúzí v laminárním toku (TDLFP) a pomocí elektroforeticky zprostředkované mikroanalýzy (EMMA) byla srovnána z hlediska účinnosti míchání, citlivosti, opakovatelnosti a aplikovatelnosti na různé biologické vzorky.

Návaznosti

• GBP206/12/G014, projekt VaV: Název: Centrum pokročilých bioanalytických technologií
• MUNI/A/1278/2016, interní kód MU: Název: Podpora biochemického výzkumu v roce 2017

Investor: Masarykova univerzita, Podpora biochemického výzkumu v roce 2017, DO R. 2020_Kategorie A - Specifický výzkum - Studentské výzkumné projekty