2018
Study of metabolic activity of human embryos focused on amino acids by capillary electrophoresis with light-emitting diode-induced fluorescence detection
CELÁ, Andrea, Aleš MÁDR, Michal JEŠETA, Jana ŽÁKOVÁ, Igor CRHA et. al.Základní údaje
Originální název
Study of metabolic activity of human embryos focused on amino acids by capillary electrophoresis with light-emitting diode-induced fluorescence detection
Název česky
Studium metabolické aktivity lidských embryí zaměřené na aminokyseliny pomocí kapilární elektroforézy s fluorescenční detekcí
Autoři
CELÁ, Andrea (203 Česká republika, domácí), Aleš MÁDR (203 Česká republika, domácí), Michal JEŠETA (203 Česká republika, domácí), Jana ŽÁKOVÁ (203 Česká republika, domácí), Igor CRHA (203 Česká republika, domácí) a Zdeněk GLATZ (203 Česká republika, garant, domácí)
Vydání
Electrophoresis, Weinheim, Verlag Chemie, 2018, 0173-0835
Další údaje
Jazyk
angličtina
Typ výsledku
Článek v odborném periodiku
Obor
10608 Biochemistry and molecular biology
Stát vydavatele
Německo
Utajení
není předmětem státního či obchodního tajemství
Odkazy
Impakt faktor
Impact factor: 2.754
Kód RIV
RIV/00216224:14310/18:00101108
Organizační jednotka
Přírodovědecká fakulta
UT WoS
000451894000012
Klíčová slova anglicky
Amino acids; Capillary electrophoresis with light emitting diode induced fluorescence detection;
Příznaky
Mezinárodní význam, Recenzováno
Změněno: 23. 4. 2024 12:24, Mgr. Michal Petr
V originále
Assisted reproduction is a quickly developing field of reproductive medicine whose importance is growing every year due to the increasing number of patients suffering from infertility. As a result, there is a need for the continuous development and/or improvement of assisted reproductive technologies. This paper presents a new method for the in vitro measurement of the amino acid turnover of developing embryos based on capillary electrophoresis with light-emitting diode-induced fluorescence detection. Amino acids were derivatized with naphthalene-2,3-dicarboxaldehyde/NaCN, and the resulting fluorescent derivatives were baseline resolved within 25 min in a background electrolyte comprised of 50 mM sodium tetraborate, 73 mM sodium dodecyl sulphate, 5 mM sodium deoxycholate and 2.5 mM (2 hydroxypropyl)-beta cyclodextrin (pH 9.3). The migration time and the peak area repeatability (n = 10) were below 0.5 % and 4.3 %, respectively. The limits of detection ranged from 12.6 nM (histidine) to 39.3 nM (taurine). The developed method, which only requires 2 ul of raw sample, was successfully applied for determining the metabolic activity of human embryos exposed to different environmental stress conditions.
Česky
Asistovaná reprodukce je rychle se rozvíjející oblast reprodukční medicíny, jejíž důležitost se zvyšuje každým rokem v důsledku rostoucího počtu párů trpících neplodností. Důsledkem toho je třeba neustálého vývoje a/nebo zlepšování technik využívaných v asistované reprodukci. Tento článek uvádí novou metodu pro sledování metabolického obratu aminokyselin u lidských embryí vyvíjejících se in vitro založenou na kapilární elektroforéze s fluorescenční detekcí. Obsažené aminokyseliny byly derivatizovány naftalen-2,3-dikarboxaldehydem v přítemnosti NaCN a vzniklé fluorescenční deriváty byly separovány s rozlišením k základní linii do 25 minut v základním elektrolytu obsahujícím 50 mM tetraboritan disodný, 73 mM dodecylsulfát sodný, 5 mM deoxycholát sodný a 2,5 mM (2 hydroxypropyl)-betacyklodextrin (pH 9.3). Opakovatelnosti (n = 10) migračních časů a ploch píků byly pod 0,5 %, respektive 4,3 %. Limity detekce se pohybovaly od 12,6 nM (histidin) do 39,3 nM (taurin). Vyvinutá metoda, která vyžaduje pouze 2 ul vzorku, byla úspěšně aplikována pro stanovení metabolické aktivity lidských embryí vystavených různým kultivačním podmínám.
Návaznosti
GBP206/12/G014, projekt VaV |
|