J 2018

Study of metabolic activity of human embryos focused on amino acids by capillary electrophoresis with light-emitting diode-induced fluorescence detection

CELÁ, Andrea, Aleš MÁDR, Michal JEŠETA, Jana ŽÁKOVÁ, Igor CRHA et. al.

Základní údaje

Originální název

Study of metabolic activity of human embryos focused on amino acids by capillary electrophoresis with light-emitting diode-induced fluorescence detection

Název česky

Studium metabolické aktivity lidských embryí zaměřené na aminokyseliny pomocí kapilární elektroforézy s fluorescenční detekcí

Autoři

CELÁ, Andrea (203 Česká republika, domácí), Aleš MÁDR (203 Česká republika, domácí), Michal JEŠETA (203 Česká republika, domácí), Jana ŽÁKOVÁ (203 Česká republika, domácí), Igor CRHA (203 Česká republika, domácí) a Zdeněk GLATZ (203 Česká republika, garant, domácí)

Vydání

Electrophoresis, Weinheim, Verlag Chemie, 2018, 0173-0835

Další údaje

Jazyk

angličtina

Typ výsledku

Článek v odborném periodiku

Obor

10608 Biochemistry and molecular biology

Stát vydavatele

Německo

Utajení

není předmětem státního či obchodního tajemství

Odkazy

Impakt faktor

Impact factor: 2.754

Kód RIV

RIV/00216224:14310/18:00101108

Organizační jednotka

Přírodovědecká fakulta

UT WoS

000451894000012

Klíčová slova anglicky

Amino acids; Capillary electrophoresis with light emitting diode induced fluorescence detection;

Štítky

Příznaky

Mezinárodní význam, Recenzováno
Změněno: 23. 4. 2024 12:24, Mgr. Michal Petr

Anotace

V originále

Assisted reproduction is a quickly developing field of reproductive medicine whose importance is growing every year due to the increasing number of patients suffering from infertility. As a result, there is a need for the continuous development and/or improvement of assisted reproductive technologies. This paper presents a new method for the in vitro measurement of the amino acid turnover of developing embryos based on capillary electrophoresis with light-emitting diode-induced fluorescence detection. Amino acids were derivatized with naphthalene-2,3-dicarboxaldehyde/NaCN, and the resulting fluorescent derivatives were baseline resolved within 25 min in a background electrolyte comprised of 50 mM sodium tetraborate, 73 mM sodium dodecyl sulphate, 5 mM sodium deoxycholate and 2.5 mM (2 hydroxypropyl)-beta cyclodextrin (pH 9.3). The migration time and the peak area repeatability (n = 10) were below 0.5 % and 4.3 %, respectively. The limits of detection ranged from 12.6 nM (histidine) to 39.3 nM (taurine). The developed method, which only requires 2 ul of raw sample, was successfully applied for determining the metabolic activity of human embryos exposed to different environmental stress conditions.

Česky

Asistovaná reprodukce je rychle se rozvíjející oblast reprodukční medicíny, jejíž důležitost se zvyšuje každým rokem v důsledku rostoucího počtu párů trpících neplodností. Důsledkem toho je třeba neustálého vývoje a/nebo zlepšování technik využívaných v asistované reprodukci. Tento článek uvádí novou metodu pro sledování metabolického obratu aminokyselin u lidských embryí vyvíjejících se in vitro založenou na kapilární elektroforéze s fluorescenční detekcí. Obsažené aminokyseliny byly derivatizovány naftalen-2,3-dikarboxaldehydem v přítemnosti NaCN a vzniklé fluorescenční deriváty byly separovány s rozlišením k základní linii do 25 minut v základním elektrolytu obsahujícím 50 mM tetraboritan disodný, 73 mM dodecylsulfát sodný, 5 mM deoxycholát sodný a 2,5 mM (2 hydroxypropyl)-betacyklodextrin (pH 9.3). Opakovatelnosti (n = 10) migračních časů a ploch píků byly pod 0,5 %, respektive 4,3 %. Limity detekce se pohybovaly od 12,6 nM (histidin) do 39,3 nM (taurin). Vyvinutá metoda, která vyžaduje pouze 2 ul vzorku, byla úspěšně aplikována pro stanovení metabolické aktivity lidských embryí vystavených různým kultivačním podmínám.

Návaznosti

GBP206/12/G014, projekt VaV
Název: Centrum pokročilých bioanalytických technologií