J 2018

A label-free MALDI TOF MS-based method for studying the kinetics and inhibitor screening of the Alzheimer’s disease drug target beta-secretase

MACHÁLKOVÁ, Markéta, Jan SCHEJBAL, Zdeněk GLATZ a Jan PREISLER

Základní údaje

Originální název

A label-free MALDI TOF MS-based method for studying the kinetics and inhibitor screening of the Alzheimer’s disease drug target beta-secretase

Autoři

MACHÁLKOVÁ, Markéta (203 Česká republika, domácí), Jan SCHEJBAL (203 Česká republika, domácí), Zdeněk GLATZ (203 Česká republika, domácí) a Jan PREISLER (203 Česká republika, garant, domácí)

Vydání

Analytical and Bioanalytical Chemistry, Německo, Springer, 2018, 1618-2642

Další údaje

Jazyk

angličtina

Typ výsledku

Článek v odborném periodiku

Obor

10406 Analytical chemistry

Stát vydavatele

Německo

Utajení

není předmětem státního či obchodního tajemství

Odkazy

Impakt faktor

Impact factor: 3.286

Kód RIV

RIV/00216224:14310/18:00101194

Organizační jednotka

Přírodovědecká fakulta

DOI

UT WoS

000447989800017

Klíčová slova anglicky

MALDI; mass spectrometry; BACE1; enzyme kinetics; enzyme inhibition; Alzheimer's disease

Příznaky

Mezinárodní význam, Recenzováno
Změněno: 6. 10. 2022 21:51, prof. Mgr. Jan Preisler, Ph.D.

Anotace

V originále

Matrix-assisted laser desorption/ionization time-of-flight mass spectrometry (MALDI TOF MS) is a well-established method with a unique set of qualities including sensitivity, minute sample consumption, and label-free detection, all of which are highly desired in enzyme assays. On the other hand, the application of MALDI TOF MS is usually limited by high concentrations of MS-incompatible compounds in the reaction mixture such as salts or organic solvents. Here, we introduce kinetic and inhibition studies of beta-secretase (BACE1), a key enzyme of the progression of Alzheimer’s disease. Compatibility of the enzyme assay with MALDI TOF MS was achieved, providing both a complex protocol including a desalting step designed for rigorous kinetic studies and a simple mix-and-measure protocol designed for high-throughput inhibitor screening. In comparison with fluorescent or colorimetric assays, MALDI TOF MS represents a sensitive, fast, and label-free technique with minimal sample preparation. In contrast to other MS-based methodological approaches typically used in drug discovery processes, such as a direct injection MS or MS-coupled liquid chromatography or capillary electrophoresis, MALDI TOF MS enables direct analysis and is a highly suitable approach for high-throughput screening. The method’s applicability is strongly supported by the high correlation of the acquired kinetic and inhibition parameters with data from the literature as well as from our previous research.

Návaznosti

GA16-06106S, projekt VaV
Název: Vysoce efektivní systém založený na kapilární elektroforéze pro screening inhibitorů beta-sekretázy jako terapeutického cíle pro Alzheimerovu chorobu (Akronym: Alzheimer)
Investor: Grantová agentura ČR, Vysoce efektivní systém založený na kapilární elektroforéze pro screening inhibitorů beta-sekretázy jako terapeutického cíle pro Alzheimerovu chorobu
LQ1601, projekt VaV
Název: CEITEC 2020 (Akronym: CEITEC2020)
Investor: Ministerstvo školství, mládeže a tělovýchovy ČR, CEITEC 2020
MUNI/A/1278/2016, interní kód MU
Název: Podpora biochemického výzkumu v roce 2017
Investor: Masarykova univerzita, Podpora biochemického výzkumu v roce 2017, DO R. 2020_Kategorie A - Specifický výzkum - Studentské výzkumné projekty
MUNI/G/0974/2016, interní kód MU
Název: Optimalizace cílené terapie kolorektálního karcinomu ovlivňováním účinnosti penetrace a cytotoxicity regulátorů buněčných signalizací
Investor: Masarykova univerzita, Optimalizace cílené terapie kolorektálního karcinomu ovlivňováním účinnosti penetrace a cytotoxicity regulátorů buněčných signalizací, INTERDISCIPLINARY - Mezioborové výzkumné projekty