Describing 14-3-3 dimerization: tools to obtain KD

NÁPLAVOVÁ, Alexandra, Aneta KOZELEKOVÁ a Jozef HRITZ. Describing 14-3-3 dimerization: tools to obtain KD. In XXII. Workshop of Biophysical Chemists and Electrochemists. 2022. ISBN 978-80-280-0087-5.

Základní údaje

• Originální název: Describing 14-3-3 dimerization: tools to obtain KD
• Autoři: NÁPLAVOVÁ, Alexandra, Aneta KOZELEKOVÁ a Jozef HRITZ.
• Vydání: XXII. Workshop of Biophysical Chemists and Electrochemists. 2022.

Další údaje

• Originální jazyk: angličtina
• Typ výsledku: Konferenční abstrakt
• Obor: 10608 Biochemistry and molecular biology
• Stát vydavatele: Česká republika
• Utajení: není předmětem státního či obchodního tajemství
• WWW: URL
• ISBN: 978-80-280-0087-5
• Klíčová slova česky: 14-3-3 protein; monomerizace; disociační konstanta; 19F NMR
• Klíčová slova anglicky: 14-3-3 protein, monomerization; dissociation constant; 19F NMR

Anotace

The self-association of proteins is one of the cornerstones of cellular processes. The oligomerization is a fundamental way of protein regulation, influencing their functionality and interactome [1]. Therefore, a strong need for quantitative analysis of oligomerization extent arises when studying proteins. A parameter especially useful for description of self-association is dissociation constant KD [2]. Such constant provides us picture of equilibrium between monomers and higher oligomers, at any given concentration. During our research, we focus closely on 14-3-3 proteins. 14-3-3s are regulators ubiquitous in eukaryotic cells, connected to neurodegenerative and oncologic diseases [3]. In their native state, dimers are formed, crucial for proper function [4]. However, it was revealed that phosphorylation at Ser58 of 14-3-3ζ leads to monomerization [5,6]. Here, we present an array of biophysical techniques used for oligomeric state quantification of several 14-3-3ζ constructs: wild type, phosphorylated at Ser58, monomeric and phosphomimicking mutants [5,7]. Contrary to majority of 14-3-3 studies, dimerization description via KD is not biased by used protein concentration. The importance of knowledge of KD is demonstrated, as differences in order of magnitude were discovered [5]. Moreover, workflow for KD determination via 19F Trp NMR is presented, exploiting that tryptophan is not only one of the rarest amino acids, but also has a unique role in protein self-association [8].

Návaznosti

• LM2018127, velká výzkumná infrastruktura: Název: Česká infrastruktura pro integrativní strukturní biologii (Akronym: CIISB)

Investor: Ministerstvo školství, mládeže a tělovýchovy ČR, Czech Infrastructure for Integrative Structural Biology

• LM2018127, velká výzkumná infrastruktura: Název: Czech Infrastructure for Integrative Structural Biology (Akronym: CIISB)

Investor: Ministerstvo školství, mládeže a tělovýchovy ČR, Czech Infrastructure for Integrative Structural Biology

• LTAUSA18168, projekt VaV: Název: Selektivní NMR značení jako nástroj pro charakterizaci proteinových komplexů zapojených do neurodegenerativních onemocnění

Investor: Ministerstvo školství, mládeže a tělovýchovy ČR, Selektivní NMR značení jako nástroj pro charakterizaci proteinových komplexů zapojených do neurodegenerativních onemocnění, INTER-ACTION

• MUNI/C/0091/2022, interní kód MU: Název: Structural and interaction properties of 14-3-3 proteins in the monomeric state.

Investor: Masarykova univerzita, Structural and interaction properties of 14-3-3 proteins in the monomeric state., Podpora vynikajících diplomových prací