1999
Use of Rifampicin in T7 RNA Polymerase-Driven Expression of a Plant Enzyme. Rifampicin Improves Yield and Assembly.
KUDEROVÁ, Alena, Elizabeth NANAK, Martin TRUKSA a Břetislav BRZOBOHATÝZákladní údaje
Originální název
Use of Rifampicin in T7 RNA Polymerase-Driven Expression of a Plant Enzyme. Rifampicin Improves Yield and Assembly.
Autoři
KUDEROVÁ, Alena (203 Česká republika, domácí), Elizabeth NANAK, Martin TRUKSA a Břetislav BRZOBOHATÝ (203 Česká republika, garant, domácí)
Vydání
Protein Expression and Purification, San Diego, California, Academic Press, 1999, 1046-5928
Další údaje
Jazyk
angličtina
Typ výsledku
Článek v odborném periodiku
Obor
Genetika a molekulární biologie
Stát vydavatele
Spojené státy
Utajení
není předmětem státního či obchodního tajemství
Impakt faktor
Impact factor: 1.416
Kód RIV
RIV/00216224:14310/99:00000965
Organizační jednotka
Přírodovědecká fakulta
UT WoS
000081814900005
Klíčová slova anglicky
rifampicin - protein expression - T7 RNA polymerase - beta-glucosidase
Štítky
Změněno: 27. 5. 2013 11:48, RNDr. Alena Kuderová, CSc.
V originále
Expression systems based on high selectivity and activity of T7 RNA polymerase and presence of a strong T7 promoter have been commonly used for cloning and expression of various recombinant proteins in Escherichia coli. When protein expression is not directed to periplasm, the final yield and quality of the synthesized and purified protein then depend on various factors, protein size, amino acid sequence, solubility in cytoplasm, and folding requirements among them. The yield in the T7 RNA polymerase/promoter system can be positively influenced by use of rifampicin. In this report we describe rifampicin-enhaced expression of a plant cytokinin-specific beta-glucosidase. The antibiotic not only increased the yield of the recombinant protein, which seems to be a general phenomenon, but also favored the final assembly of the protein's subunits into a catalytically active dimer form.
Česky
Expresní systémy založené na vysoké selektivitě a aktivitě T7 RNA polymerázy a přítomnosti silného T7 promotoru se běžně využívají při klonování a expresi rekombinantních proteinů v Escherichia coli. V případě, že exprese není směrována do periplazmy, konečný výtěžek a kvalita syntetizovaného proteinu závisejí na velikosti a primární sekvenci proteinu, jeho rozpustnosti v cytoplazmě včetně jeho schopnosti poskládat se za daných podmínek do terciární či kvartérní struktury. V T7 RNA polymerázovém/promotorovém systému může být tento výtěžek zvýšen použitím rifampicinu a tato práce jeho užitečnost v tomto směru detailně popisuje na příkladu exprese rostlinné cytokinin-specifické betaglukozidázy. Antibiotikum nejen zvyžuje výtěžek její exprese, ale také usnadňuje konečné uspořádání proteinových podjednotek do katalyticky aktivní dimerní formy.
Návaznosti
| MSM 143100008, záměr |
| ||
| VS96096, projekt VaV |
|