Vývoj nových trombolytik – strategie testování efektivity trombolýzy na in vivo modelu u potkana .

HLOŽKOVÁ, Jana, Peter SCHEER, Ahmet DAVUT AKSU, Robert MIKULÍK, Jiří DAMBORSKÝ a Eliška BRHELOVÁ. Vývoj nových trombolytik – strategie testování efektivity trombolýzy na in vivo modelu u potkana . In 50. ČESKÝ A SLOVENSKÝ CEREBROVASKULÁRNÍ KONGRES, 23. června, Mikulov. 2022.

Základní údaje

• Originální název: Vývoj nových trombolytik – strategie testování efektivity trombolýzy na in vivo modelu u potkana .
• Název česky: Vývoj nových trombolytik – strategie testování efektivity trombolýzy na in vivo modelu u potkana
• Název anglicky: Development of new thrombolytics - a strategy for testing the effectiveness of thrombolysis in an in vivo rat model
• Autoři: HLOŽKOVÁ, Jana (203 Česká republika, domácí), Peter SCHEER (203 Česká republika, garant, domácí), Ahmet DAVUT AKSU (792 Turecko, domácí), Robert MIKULÍK (203 Česká republika), Jiří DAMBORSKÝ (203 Česká republika) a Eliška BRHELOVÁ (203 Česká republika, domácí).
• Vydání: 50. ČESKÝ A SLOVENSKÝ CEREBROVASKULÁRNÍ KONGRES, 23. června, Mikulov, 2022.

Další údaje

• Originální jazyk: čeština
• Typ výsledku: Prezentace na konferencích
• Obor: 30104 Pharmacology and pharmacy
• Stát vydavatele: Česká republika
• Utajení: není předmětem státního či obchodního tajemství
• WWW: webové stránky akce
• Kód RIV: RIV/00216224:14160/22:00129748
• Organizační jednotka: Farmaceutická fakulta
• Klíčová slova česky: trombolýza- in vivo výzkum- potkan
• Klíčová slova anglicky: thrombolysis- in vivo research- rat

Anotace

Úvod: In-vivo testování trombolytik musí splňovat primárně schopnost hodnotit trombolýzu jako dynamický proces. Toto kritérium lze splnit pomocí přímého sledování trombolýzy skiaskopem nebo výpočetní tomografií. Cíl: Vyvinout experimentální model systémové embolie (SE) umožňující přímé sledování trombolýzy v in vivo modelu u potkana. Metodologie: Model používá umělé sraženiny (AC) připravené z tkáňového lepidla na bázi lidského fibrinu a pro rentgenologickou vizualizaci byl přidán síran barnatý. SE byla indukovaná aplikací AC (3 kusy, délka 10 mm) retrográdně ze společné karotidy do aortálního oblouku. Zvířata byla snímkována současně se zahájením trombolytické terapie. Pro detekci lýzy byla použita skiaskopie (permanentní živý obraz, záznam každých 5 minut) a mikroCT (záznam každých 10 minut). Model byl použit úspěšně u 144 skiaskopií a 25 mikroCT vyšetření. Skiaskopické snímky byly analyzovány pomoci software ImageJ, mikroCT pomocí software Bruker CTan. Výsledky: Model SE je bezpečný a v případě úspěšné aplikace AC má nulovou mortalitu. Při použití mikroCT je počet hodnocených AC stejný nebo vyšší než aplikovaný (možnost fragmentace AC při aplikaci). U skiagrafie byl počet analyzovaných AC 309, průměrný počet měřených AC 2,15±0,74. Limitem skiagrafie je 1/ 2D obraz (měřený stín je ovlivněn projekčním úhlem) a 2/ relativním limitem je počet zobrazených AC nižší, než počet aplikovaných AC, 3/ nižší kvalita zobrazení AC v mozkových cévách. Limitem mikroCT je 1/ pohybová neostrost v případě AC v mezenterických tepnách, 2/ relativně malá skenovaná část zvířete, při které lze sledovat současně maximálně 2 sraženiny v abdominální oblasti. Výhodou skiaskopie je „real-time“ obraz, možnost provádět katetrizační zákroky včetně angiografie, velice nízká radiační zátěž. Výhodou mikroCT je vysoká přesnost v měření změn objemu sraženiny ve 3D vizualizaci a excelentní zobrazení malých AC v mozkových cévách. Model SE sleduje jenom efektivitu trombolýzy, bezpečnost lze nepřímo Závěr: Použití umělých sraženin s kontrastní látkou na bázi síranu barnatého umožňuje rentgenologicky kvantifikovat rychlost rozpadu sraženiny a konstruovat lytickou křivku. Jednoduchost, opakovatelnost a robustnost modelu umožní porovnání trombolytického účinku nových potenciálních trombolytik, nebo jejich kombinací. Aplikace více AC umožňuje multiplikaci lytických křivek a tedy nakonec snižuje počet použitých laboratorních zvířat.

Anotace anglicky

In-vivo testing of thrombolytics must primarily meet the ability to evaluate thrombolysis as a dynamic process. This criterion can be met by direct monitoring of thrombolysis with a fluoroscopy or computed tomography. Objective: To develop an experimental model of systemic embolism (SE) allowing direct monitoring of thrombolysis in an in vivo rat model. Methodology: The model uses artificial clots (AC) prepared from human fibrin-based tissue glue and barium sulfate was added for radiographic visualization. SE was induced by applying AC (3 pieces, length 10 mm) retrograde from the common carotid to the aortic arch. Animals were imaged simultaneously with initiation of thrombolytic therapy. Fluoroscopy (permanent live image, recording every 5 minutes) and microCT (recording every 10 minutes) were used to detect lysis. The model was used successfully in 144 fluoroscopy and 25 microCT examinations. Fluoroscopy images were analyzed using ImageJ software, mikroCT using Bruker CTan software. Results: The SE model is safe and has zero mortality in case of successful AC application. When using mikroCT, the number of evaluated AC is equal to or higher than that applied (possibility of fragmentation of AC during application). In skiagraphy, the number of analyzed ACs was 309, the average number of measured ACs was 2.15±0.74. The limit of skiagraphy is 1/ the 2D image (the measured shadow is affected by the projection angle) and 2/ the relative limit is the number of displayed ACs is lower than the number of applied ACs, 3/ the lower quality of displaying ACs in cerebral vessels. The limit of microCT is 1/ motion blur in the case of AC in the mesenteric arteries, 2/ a relatively small scanned part of the animal, during which a maximum of 2 clots in the abdominal area can be observed simultaneously. The advantage of fluoroscopy is a "real-time" image, the possibility of performing catheterization procedures including angiography, very low radiation exposure. The advantage of microCT is high accuracy in measuring changes in clot volume in 3D visualization and excellent imaging of small ACs in cerebral vessels. The SE model only monitors the effectiveness of thrombolysis, the safety can be assessed indirectly. Conclusion: The use of artificial clots with a contrast agent based on barium sulfate allows radiologically quantifying the rate of clot disintegration and constructing a lytic curve. The simplicity, repeatability and robustness of the model will allow comparison of the thrombolytic effect of new potential thrombolytics or their combinations. The application of more AC allows the multiplication of lytic curves and thus ultimately reduces the number of laboratory animals used.

Návaznosti

• NU21-08-00510, projekt VaV: Název: Biokompatibilní nanočástice jako cílené systémy pro dodávání léčiv a teranostik pro léčbu cévní mozkové příhody

Investor: Ministerstvo zdravotnictví ČR, Biokompatibilní nanočástice jako cílené systémy pro dodávání léčiv a teranostik pro léčbu cévní mozkové příhody