J 2023

Benchmarking of Two Peptide Clean-Up Protocols: SP2 and Ethyl Acetate Extraction for Sodium Dodecyl Sulfate or Polyethylene Glycol Removal from Plant Samples before LC-MS/MS

MARTINKOVÁ, Petra, Hana KONEČNÁ, Petr GINTAR, Karolína KRYŠTOFOVÁ, David POTĚŠIL et. al.

Základní údaje

Originální název

Benchmarking of Two Peptide Clean-Up Protocols: SP2 and Ethyl Acetate Extraction for Sodium Dodecyl Sulfate or Polyethylene Glycol Removal from Plant Samples before LC-MS/MS

Autoři

MARTINKOVÁ, Petra (203 Česká republika, domácí), Hana KONEČNÁ (203 Česká republika, domácí), Petr GINTAR (203 Česká republika, domácí), Karolína KRYŠTOFOVÁ (203 Česká republika, domácí), David POTĚŠIL (203 Česká republika, domácí), Martin TRTÍLEK (203 Česká republika) a Zbyněk ZDRÁHAL (203 Česká republika, garant, domácí)

Vydání

INTERNATIONAL JOURNAL OF MOLECULAR SCIENCES, MDPI, 2023, 1661-6596

Další údaje

Jazyk

angličtina

Typ výsledku

Článek v odborném periodiku

Obor

10608 Biochemistry and molecular biology

Stát vydavatele

Švýcarsko

Utajení

není předmětem státního či obchodního tajemství

Odkazy

Impakt faktor

Impact factor: 5.600 v roce 2022

Kód RIV

RIV/00216224:14740/23:00133126

Organizační jednotka

Středoevropský technologický institut

UT WoS

001132258900001

Klíčová slova anglicky

peptide clean-up; magnetic beads; SP2; ethyl acetate extraction; sodium dodecyl sulfate; detergent; polyethylene glycol; Arabidopsis thaliana; LC-MS/MS

Štítky

Příznaky

Mezinárodní význam, Recenzováno
Změněno: 6. 4. 2024 21:11, Mgr. Eva Dubská

Anotace

V originále

The success of bottom-up proteomic analysis frequently depends on the efficient removal of contaminants from protein or peptide samples before LC-MS/MS. For a peptide clean-up workflow, single-pot solid-phase-enhanced peptide sample preparation on carboxylate-modified paramagnetic beads (termed SP2) was evaluated for sodium dodecyl sulfate or polyethylene glycol removal from Arabidopsis thaliana tryptic peptides. The robust and efficient 40-min SP2 protocol, tested for 10-ng, 250-ng, and 10-µg peptide samples, was proposed and benchmarked thoroughly against the ethyl acetate extraction protocol. The SP2 protocol on carboxylated magnetic beads proved to be the most robust approach, even for the simultaneous removal of massive sodium dodecyl sulfate (SDS) and polyethylene glycol (PEG) contaminations from AT peptide samples in respect of the LC-MS/MS data outperforming ethyl acetate extraction.

Návaznosti

EF16_026/0008446, projekt VaV
Název: Integrace signálu a epigenetické reprogramování pro produktivitu rostlin
EF18_072/0015659, projekt VaV
Název: e-INFRA CZ: Modernizace
LM2023042, projekt VaV
Název: Česká infrastruktura pro integrativní strukturní biologii
Investor: Ministerstvo školství, mládeže a tělovýchovy ČR, CIISB - Česká infrastruktura pro integrativní strukturní biologii
90242, velká výzkumná infrastruktura
Název: CIISB III
90254, velká výzkumná infrastruktura
Název: e-INFRA CZ II