Vliv varianty S1021Qfs*98 v genu hERG na aktivaci a deaktivaci proteinu Kv11.1

JANKOVÁ, Natálie, Martin KRÁL, Olga ŠVECOVÁ, Jiří PACHERNÍK, Tomáš NOVOTNÝ a Markéta BÉBAROVÁ. Vliv varianty S1021Qfs*98 v genu hERG na aktivaci a deaktivaci proteinu Kv11.1. In 99. Fyziologické dny. 2024.

Základní údaje

• Originální název: Vliv varianty S1021Qfs*98 v genu hERG na aktivaci a deaktivaci proteinu Kv11.1
• Název anglicky: Effect of S1021Qfs*98 variant in the hERG gene on activation and deactivation of Kv11.1 protein
• Autoři: JANKOVÁ, Natálie (203 Česká republika, domácí), Martin KRÁL (203 Česká republika, domácí), Olga ŠVECOVÁ (203 Česká republika, domácí), Jiří PACHERNÍK (203 Česká republika), Tomáš NOVOTNÝ (203 Česká republika, domácí) a Markéta BÉBAROVÁ (203 Česká republika, garant, domácí).
• Vydání: 99. Fyziologické dny, 2024.

Další údaje

• Originální jazyk: čeština
• Typ výsledku: Konferenční abstrakt
• Obor: 30201 Cardiac and Cardiovascular systems
• Stát vydavatele: Slovensko
• Utajení: není předmětem státního či obchodního tajemství
• Organizační jednotka: Lékařská fakulta
• Klíčová slova česky: hERG; draslíkový proud; genetická varianta; loss-of-function
• Klíčová slova anglicky: hERG; potassium current; genetic variant; loss-of-function

Anotace

Úvod: Protein Kv11.1 kódovaný genem hERG formuje podjednotku draslíkového kanálu významně přispívajícího k repolarizaci myokardu. Cílem této studie je funkční charakteristika dvou variant v genu hERG, A228V a S1021Qfs*98, které byly nalezeny u probandky s idiopatickou fibrilací komor. Metodika: Měření byla provedena metodou whole cell patch clamp v módu voltage clamp při 37 °C na Chinese hamster ovary (CHO) buňkách, které byly přechodně transfekovány plazmidy nesoucími gen hERG bez mutace (WT) a s mutací S1021Qfs*98. Výsledky: Aktivace kanálu postiženého mutací vykazovala 70% pokles proudu ve srovnání s WT (při 0 mV: 219,4 pA u WT vs. 65,3 pA u S1021Qfs*98; P < 0,01, n = 17 a 18 u WT, resp. S1021Qfs*98). K signifikantní změně napěťové nebo časové závislosti ustálené aktivace však nedošlo. Rychlost deaktivace rovněž nevykazovala signifikantní změny (při -90 mV: 122,1 ms u WT vs. 144,2 ms u S1021Qfs*98; P > 0,05, n = 15 a 16 u WT, resp. S1021Qfs*98). Závěr: Varianta S1021Qfs*98-Kv11.1 zapříčinila pokles draslíkového proudu o 70 % ve srovnání s WT, avšak nedošlo k signifikantním změnám v časové a napěťové závislosti aktivace a deaktivace mutovaného kanálu. Stejně jako u jiných loss-of-function mutací v genu hERG, které obvykle způsobují zpoždění repolarizace, lze předpokládat arytmogenní potenciál studované varianty.

Anotace anglicky

Introduction: The Kv11.1 protein encoded by the hERG gene forms a subunit of the potassium channel that contributes significantly to myocardial repolarization. The aim of this study is the functional characterization of two variants in the hERG gene, A228V and S1021Qfs*98, found in a proband with idiopathic ventricular fibrillation. Methods: measurements were performed by whole cell patch clamp method in voltage clamp mode at 37 °C on Chinese hamster ovary (CHO) cells transiently transfected with plasmids carrying the hERG gene without mutation (WT) and with the S1021Qfs*98 mutation. RESULTS: Activation of the channel affected by the mutation showed a 70% decrease in current compared with WT (at 0 mV: 219.4 pA for WT vs. 65.3 pA for S1021Qfs*98; P < 0.01, n = 17 and 18 for WT and S1021Qfs*98, respectively). However, there was no significant change in the voltage or time dependence of steady-state activation. The rate of deactivation also showed no significant change (at -90 mV: 122.1 ms in WT vs. 144.2 ms in S1021Qfs*98; P > 0.05, n = 15 and 16 in WT and S1021Qfs*98, respectively). Conclusion. The S1021Qfs*98-Kv11 variant. 1 caused a 70% decrease in potassium current compared to WT, but there were no significant changes in the time and voltage dependence of mutant channel activation and deactivation. As with other loss-of-function mutations in the hERG gene, which usually cause a delay in repolarization, the arrhythmogenic potential of the studied variant can be assumed.

Návaznosti

• MUNI/A/1343/2022, interní kód MU: Název: Zátěže kardiovaskulárního systému od A po Z

Investor: Masarykova univerzita, Zátěže kardiovaskulárního systému od A po Z

• MUNI/A/1547/2023, interní kód MU: Název: Analýza (dys)funkce: od molekul k živému organismu

Investor: Masarykova univerzita, Analýza (dys)funkce: od molekul k živému organismu

• NU22-02-00348, projekt VaV: Název: Funkční hodnocení genetických variant u případů klinicky „skutečné“ idiopatické fibrilace komor: in vitro a in silico modelování s cílem odhalit arytmogenní mechanismus

Investor: Ministerstvo zdravotnictví ČR, Funkční hodnocení genetických variant u případů klinicky „skutečné“ idiopatické fibrilace komor: in vitro a in silico modelování s cílem odhalit arytmogenní mechanismus, Podprogram 1 - standardní