Změny neuronální elektrické aktivity pod vlivem glutamátu a snížené exprese miR-142-5p

POLEDŇÁKOVÁ, Anna, Zita GOLIÁŠOVÁ, Olga ŠVECOVÁ, Martin KRÁL, Milan BRÁZDIL a Markéta BÉBAROVÁ. Změny neuronální elektrické aktivity pod vlivem glutamátu a snížené exprese miR-142-5p. In 99. Fyziologické dny. 2024.

Základní údaje

Originální název

Změny neuronální elektrické aktivity pod vlivem glutamátu a snížené exprese miR-142-5p

Název anglicky

Changes of neuronal electrical activity under the effect of glutamate and lower expression of miR-142-5p

Autoři

POLEDŇÁKOVÁ, Anna (203 Česká republika, domácí), Zita GOLIÁŠOVÁ (203 Česká republika), Olga ŠVECOVÁ (203 Česká republika, domácí), Martin KRÁL (203 Česká republika, domácí), Milan BRÁZDIL (203 Česká republika, domácí) a Markéta BÉBAROVÁ (203 Česká republika, garant, domácí)

Vydání

99. Fyziologické dny, 2024

---

Další údaje

Jazyk

čeština

Typ výsledku

Konferenční abstrakt

Obor

30210 Clinical neurology

Stát vydavatele

Slovensko

Utajení

není předmětem státního či obchodního tajemství

Organizační jednotka

Lékařská fakulta

Klíčová slova česky

epilepsie; miRNA; miR-142-5p; antagomir; glutamát; hipokampální neurony

Klíčová slova anglicky

epilepsy; miRNA; miR-142-5p; antagomir; glutamate; hippocampal neurons

---

Anotace

V originále

Úvod: Glutamát, hlavní excitační neurotransmiter v CNS, může být dle některých studií využit k navození epilepsie in vitro. Do rozvoje epilepsie rovněž zasahují změny exprese některých miRNA včetně miR-142-5p, což z nich činí možný terapeutický cíl. Cílem tohoto pilotního projektu bylo zhodnotit účinek specifického inhibitoru (antagomiru) proti miR-142-5p na neuronální aktivitu, ať už spontánní či navýšenou prostřednictvím glutamátu. Metodika: Měření elektrické aktivity hipokampálních neuronů izolovaných z neonatálních potkanů jsme prováděli pomocí techniky multielectrode array (MEA) od 7. dne in vitro (DIV) při vzorkovací frekvenci 25 kHz. DIV 13 byl do vybrané skupiny MEA čipů aplikován 10 μM glutamát (10-min aplikace s následným výplachem) a 6 dnů před plánovaným ukončením snímání jsme aplikovali 30 nM antagomir pro snížení exprese miR-142-5p (následuje měření 1., 2. a 5. den po jeho aplikaci). Analyzované parametry zahrnují frekvenci hrotových potenciálů (spiků) a počet aktivních elektrod. Výsledky: Během kultivace došlo k signifikantnímu nárůstu frekvence spiků i počtu aktivních elektrod jak u kontrolních MEA čipů, tak u čipů s přechodnou aplikací glutamátu (n=7, P0,05, resp. n=8, P0,01), avšak nebyl patrný rozdíl mezi kontrolou a glutamátem. Frekvence spiků po aplikaci 30 nM antagomiru vykazovala nesignifikantní sestupný trend, zatímco u kontrol nebyl obdobný pokles patrný; počet aktivních elektrod byl stabilní. Závěr: Dle našich dosavadních dat nelze přechodnou aplikaci glutamátu využít jako model epilepsie in vitro. Pilotní data poukazují na možný inhibiční vliv antagomiru proti miR-142-5p na spontánní elektrickou aktivitu neuronů. Pokud toto potvrdí i finální data, bude možné zvážit snížení exprese této miRNA jako alternativní léčbu farmakorezistentní epilepsie.

Anglicky

Introduction: Glutamate, the main excitatory neurotransmitter in the CNS, can be used to induce epilepsy in vitro according to some studies. Changes in the expression of some miRNAs, including miR-142-5p, are also involved in the development of epilepsy, making them a possible therapeutic target. The aim of this pilot project was to evaluate the effect of a specific inhibitor (antagomir) against miR-142-5p on neuronal activity, whether spontaneous or increased by glutamate. Methodology: We measured the electrical activity of hippocampal neurons isolated from neonatal rats using the multielectrode array (MEA) technique from day 7 in vitro (DIV) at a sampling frequency of 25 kHz. On DIV 13, 10 μM glutamate was applied to the selected group of MEA chips (10-min application followed by washing), and 6 days before the planned end of imaging, we applied 30 nM antagomir to reduce the expression of miR-142-5p (followed by measurements 1, 2 and 5th day after its application). Analyzed parameters include the frequency of spike potentials (spikes) and the number of active electrodes. Results: During cultivation, there was a significant increase in the frequency of spikes and the number of active electrodes both in control MEA chips and in chips with transient application of glutamate (n=7, P0.05, respectively n=8, P0.01) , but no difference was apparent between control and glutamate. Spike frequency after application of 30 nM antagomir showed a non-significant downward trend, whereas no similar decrease was evident in controls; the number of active electrodes was stable. Conclusion: According to our data so far, the transient application of glutamate cannot be used as a model of epilepsy in vitro. Pilot data point to a possible inhibitory effect of an antagomir against miR-142-5p on the spontaneous electrical activity of neurons. If this is confirmed by the final data, it will be possible to consider reducing the expression of this miRNA as an alternative treatment for drug-resistant epilepsy.

---

Návaznosti

GA23-05274S, projekt VaV	Název: Terapeutická modulace exprese miRNA u epilepsie: dopad na excitabilitu a jiné procesy v mozku Investor: Grantová agentura ČR, Terapeutická modulace exprese miRNA u epilepsie: dopad na excitabilitu a jiné procesy v mozku
MUNI/A/1343/2022, interní kód MU	Název: Zátěže kardiovaskulárního systému od A po Z Investor: Masarykova univerzita, Zátěže kardiovaskulárního systému od A po Z
MUNI/A/1547/2023, interní kód MU	Název: Analýza (dys)funkce: od molekul k živému organismu Investor: Masarykova univerzita, Analýza (dys)funkce: od molekul k živému organismu