J 2001

Theoretical versus experimental resolution in optical microscopy

KOZUBEK, Michal

Základní údaje

Originální název

Theoretical versus experimental resolution in optical microscopy

Autoři

KOZUBEK, Michal (203 Česká republika, garant, domácí)

Vydání

Microscopy research and technique, USA, Wiley-Liss, 2001, 1059-910X

Další údaje

Jazyk

angličtina

Typ výsledku

Článek v odborném periodiku

Obor

20200 2.2 Electrical engineering, Electronic engineering, Information engineering

Stát vydavatele

Spojené státy

Utajení

není předmětem státního či obchodního tajemství

Odkazy

Impakt faktor

Impact factor: 2.165

Kód RIV

RIV/00216224:14330/01:00004204

Organizační jednotka

Fakulta informatiky

DOI

UT WoS

000168393000008

Klíčová slova anglicky

resolution; confocal microscopy; wide-field microscopy; image processing; fluorescent bead

Štítky

Příznaky

Mezinárodní význam, Recenzováno
Změněno: 29. 1. 2021 18:32, prof. RNDr. Michal Kozubek, Ph.D.

Anotace

V originále

The aim of this article is to compare experimental resolution under different conditions with theoretical resolution predicted using electromagnetic diffraction theory. Imaging properties of fluorescent beads of three different diameters (0.1 mum, 0.2 mum, and 0.5 mum) as well as imaging properties of four different fluorescence-stained DNA targets (ABL gene, BCR gene, centromere 6, and centromere 17) are studied. It is shown how the dependence of the resolution on object size varies with wavelength (520 nm versus 580 nm), type of microscopy (wide-field, confocal using Nipkow disk, confocal laser scanning) and basic image processing steps (median and gaussian filters). Furthermore, specimen influence on the resolution was studied (the influence of embedding medium, coverglass thickness, and depth below the coverglass). Both lateral and axial resolutions are presented. The results clearly show that real objects are far from being points and that experimental resolution is often much worse than the theoretical one. Although the article concentrates on fluorescence imaging using high NA objectives, similar dependence can also be expected for other optical arrangements.

Návaznosti

GA202/99/P008, projekt VaV
Název: Využití analýzy obrazu při studiu struktury interfázního jádra
Investor: Grantová agentura ČR, Využití analýzy obrazu při studiu struktury interfázního jádra
MSM 143300002, záměr
Název: Využití počítačové analýzy obrazu v optické mikroskopii
Investor: Ministerstvo školství, mládeže a tělovýchovy ČR, Využití počítačové analýzy obrazu v optické mikroskopii
VS97031, projekt VaV
Název: Využití analýzy obrazu při studiu mechanismů vzniku, v diagnostice a pro prevenci závažných onemocnění člověka
Investor: Ministerstvo školství, mládeže a tělovýchovy ČR, Využití analýzy obrazu při studiu mechanismů vzniku, v diagnostice a pro prevenci závažných onemocnění člověka