2002
Detekce profágů v kmenech Staphylococcus aureus pomocí multiplex PCR
ORÁČOVÁ, Eva, Veronika KVARDOVÁ, Roman PANTŮČEK a Jiří DOŠKAŘZákladní údaje
Originální název
Detekce profágů v kmenech Staphylococcus aureus pomocí multiplex PCR
Název anglicky
Detection of prophages in Staphylococcus aureus strains using multiplex PCR
Autoři
ORÁČOVÁ, Eva (203 Česká republika), Veronika KVARDOVÁ (203 Česká republika), Roman PANTŮČEK (203 Česká republika, garant) a Jiří DOŠKAŘ (203 Česká republika)
Vydání
Informační listy Genetické společnosti Gregora Mendela, Brno, Genetická společnost Gregora Mendela, 2002, 1210-6267
Další údaje
Jazyk
čeština
Typ výsledku
Článek v odborném periodiku
Obor
Genetika a molekulární biologie
Stát vydavatele
Česká republika
Utajení
není předmětem státního či obchodního tajemství
Kód RIV
RIV/00216224:14310/02:00006635
Organizační jednotka
Přírodovědecká fakulta
Klíčová slova anglicky
Bacterial Typing Techniques; DNA; Bacteriophages; Staphylococcus aureus; Lysogeny; Multiplex PCR; Prophage detection
Štítky
Změněno: 18. 11. 2002 11:14, prof. RNDr. Roman Pantůček, Ph.D.
V originále
V genomech typizačních fágů S. aureus mezinárodní řady byly vyhledány sekvence specific-ké pro fágové druhy séroskupin A (fág 3A, 5 003 bp), B (fág 53, 3 926 bp), F (fág 77, 3 398 bp) a L (fág 187, 1 927 bp). Hybridizační sondy připravené z těchto sekvencí detekují v lyzogenních kmenench S. aureus profágy příslušných fágových druhů. K usnadnění detekce profágů byly pro každou ze specifických sond stanoveny sekvence a navrženy PCR-primery, umožňující získat pro každý fágový druh amplifikační produkt charakteristické velikosti (pro fágy serologické skupiny A: 3A-F 5' CTT TGA CAT GAC ATC CGC TTG AC 3' a 3A-R 5' TAT CAG GCG AGA ATT AAG GG 3', produkt 745 bp; pro fágy serologické skupiny B: 53-F 5' ACT TAT CCA GGT GGY GTT ATT G 3' a 53-R 5' TGT ATT TAA TTT CGC CGT TAG TG 3', produkt 405 bp; pro fágy serologické skupiny F: 77-F 5' TAC GGG AAA ATA TTC GGA AG 3' a 77-R 5' ATA ATC CGC ACC TCA TTC CT 3', produkt 548 bp a pro fágy serologické skupiny L produkt 850 bp). Optimalizací sady primerů byla zavedena multiplex PCR pro přímý důkaz přítomnosti profágů jednotlivých druhů v jediné PCR-reakci. Metoda detekce profágů byla ověřena jak na uměle lyzogenizovaných kmenech připravených na našem pracovišti, tak na kmenech z klinického materiálu. S využitím této techniky byly prokázány významné rozdíly v obsahu profágů u meticilin-rezistentních kmenů. Srovnání diskriminační schopnosti několika genotypizačních metod (PFGE, ribotypizace) prokázalo, že stanovení rozdílů v obsahu profágů představuje velmi citlivou typizační metodu, která je vhodná i pro odlišení blízce příbuzných kmenů.
Anglicky
neuvedeno
Návaznosti
GA301/02/1505, projekt VaV |
| ||
MSM 143100008, záměr |
|