D 2003

Příprava univerzální sondy pro detekci profágů v kmenech Staphylococcus aureus

PILOUSOVÁ, Lenka, Roman PANTŮČEK a Jiří DOŠKAŘ

Základní údaje

Originální název

Příprava univerzální sondy pro detekci profágů v kmenech Staphylococcus aureus

Název anglicky

Preparation of an universal probe for prophage detection in Staphylococcus aureus strains

Autoři

PILOUSOVÁ, Lenka (203 Česká republika), Roman PANTŮČEK (203 Česká republika) a Jiří DOŠKAŘ (203 Česká republika, garant)

Vydání

Brno, VII. Pracovní setkání biochemiků a molekulárních biologů, s. 65-66, 2003

Nakladatel

Masarykova univerzita

Další údaje

Jazyk

čeština

Typ výsledku

Stať ve sborníku

Obor

Genetika a molekulární biologie

Stát vydavatele

Česká republika

Utajení

není předmětem státního či obchodního tajemství

Odkazy

Kód RIV

RIV/00216224:14310/03:00008582

Organizační jednotka

Přírodovědecká fakulta

ISBN

80-210-3053-4

Klíčová slova anglicky

Bacterial Typing Techniques; DNA; Bacteriophages; Staphylococcus aureus; Lysogeny; Multiplex PCR; Prophage detection
Změněno: 13. 5. 2003 15:36, prof. RNDr. Roman Pantůček, Ph.D.

Anotace

V originále

Většina kmenů patogenního bakteriálního druhu Staphylococcus aureus je lyzogenních a obsahuje ve svém genomu jednoho nebo více profágů. Přítomnost profágů vede ke změnám fenotypových znaků hostitelských kmenů (k tzv. lyzogenním konverzím), které se často týkají jejich patogenity a virulence, anebo navozují necitlivost k dalším fágům. Cílem práce bylo identifikovat genomovou sekvenci společnou pro fágové druhy 3A, 53 a 77 reprezentující sérologické skupiny A, B a F mírných bakteriofágů mezinárodní standardní řady druhu S. aureus a využít ji k přípravě molekulární sondy pro detekci profágových sekvencí v genomech hostitelských kmenů. Vyhledání společné sekvence bylo provedeno reciprokou hybridizací značených celkových genomových DNA fágů 3A a 77 k restrikčním spektrům (HindIII/XbaI) DNA fágů 3A, 53 a 77. Hybridizující restrikční fragmenty byly klonovány a použity jako sondy k ověření přítomnosti identických sekvencí v genomech všech fágů mezinárodní řady. Z testovaných restrikčních fragmentů byl vybrán fragment HindIII/XbaI-F z fága 3A, který hybridizoval k většině fágových DNA (100% zástupců sérologické skupiny A, 100% sérologické skupiny F a 36% sérologické skupiny B fágů mezinárodní standardní řady). Byla stanovena jeho sekvence a srovnána s dosud známými sekvencemi stafylokokových bakteriofágů a profágů identifikovaných v genomech S. aureus. Tato sekvence odpovídá části genu pro integrázu a nekódující oblasti mezi tímto genem a genem pro excizionázu. Připravená sonda je vhodná pro identifikaci všech profágů séroskupin A a F a většiny profágů séroskupiny B v kmenech S. aureus . Výsledky práce ukázaly, že genomy bakteriofágů S. aureus jednotlivých séroskupin obsahují jen velmi omezený počet vzájemně homologních sekvencí DNA, mezi něž patří zejména geny, které se týkají integrace bakteriofágových genomů do genomu hostitelských kmenů.

Anglicky

neuvedeno

Návaznosti

MSM 143100008, záměr
Název: Genomy a jejich funkce
Investor: Ministerstvo školství, mládeže a tělovýchovy ČR, Genomy a jejich funkce