2003
Electrochemical determination of glutathion-S-transferase as a marker of proximal tubuls damage
VRTÍLEK, Jiří, René KIZEK, Jan VACEK a Libuše TRNKOVÁZákladní údaje
Originální název
Electrochemical determination of glutathion-S-transferase as a marker of proximal tubuls damage
Název anglicky
Electrochemical determination of glutathion-S-transferase as a marker of proximal tubuls damage
Autoři
VRTÍLEK, Jiří (203 Česká republika), René KIZEK (203 Česká republika), Jan VACEK (203 Česká republika) a Libuše TRNKOVÁ (203 Česká republika, garant)
Vydání
Brno, Czech Republic, Sborník příspěvků, VII.pracovní setkání biochemiků a molekulárních biologů, od s. 66-67, 2 s. MU Brno, 2003
Nakladatel
Masaryk University, Brno
Další údaje
Jazyk
čeština
Typ výsledku
Stať ve sborníku
Obor
10405 Electrochemistry
Stát vydavatele
Česká republika
Utajení
není předmětem státního či obchodního tajemství
Kód RIV
RIV/00216224:14310/03:00008615
Organizační jednotka
Přírodovědecká fakulta
ISBN
80-210-3053-4
Klíčová slova anglicky
Electrochemistry and HPLC of glutathion-S-transferase;catalytic hydrogen evolution;Brdicka reaction
Změněno: 3. 3. 2003 12:03, prof. RNDr. Libuše Trnková, CSc.
V originále
Poruchy metabolismu a výživy, představující jeden z klíčových problémů současné medicíny, způsobují celou řadu civilizačních onemocnění, mezi něž patří i poškození ledvin. V nedávné době bylo ukázáno, že pro přímou detekci poškození proximálních ledvinových tubulů by mohla být vhodným markerem glutathion-S-transferasa. Glutathion-S-transferasa (EC 2.5.1.18 - GST) patří do velké rodiny enzymů, které katalyzují připojení tripeptidu glutathionu (g-glutamylcysteinyl-glycin) k endogenním nebo exogenním substrátům. Glutathion připojený k hydrofobním a elektrofilním sloučeninám vytváří adukty s vyšší rozpustností ve vodě, které mohou být enzymaticky degradovány na soli merkapturových kyselin a vylučovány z organismu močí. Z hlediska renálního poškození je třeba ze čtyř tříd GST (a-GST, m-GST, p-GST a t-GST) sledovat hladinu a-GST, jejíž vzestup indikuje toto poškození. To znamená, že stanovení koncentrace a-GST v moči je senzitivní metoda pro diagnostiku renálního poškození. Bylo zjištěno, že chromatografické stanovení GST v moči není ovlivněno lékem ani změnou pH, což je pozitivním faktem pro sledování renálních funkcí u chronického ledvinového onemocnění nebo reakce ledvin po jejich transplantaci. Vedle stanovení koncentrace GST v moči pomocí HPLC byla vyzkoušena elektrochemická metoda - diferenční pulsní voltametrie doplněná technikou adsorptivního přenosu (AdT DPV). Při této technice byla GST adsorbována na různých pracovních elektrodách z malého množství pufrovaného roztoku. Registrované elektrochemické GST odezvy byly na různých pracovních elektrodách porovnávány. Bylo zjištěno, že uhlíkové elektrody poskytují velmi dobře reprodukovatelné oxidační signály tryptofanu (Trp) a tyrosinu (Tyr). Na rtuťové elektrodě (HMDE) byly pozorovány dva typy katalytických signálů GST, jednak pík H a pík odpovídající Brdičkově reakci. Na uhlíkové elektrodě byla studována závislost výšky oxidačních signálů na době akumulace a na koncentraci GST. Dá se předpokládat, že elektrochemické metody se mohou stát velmi užitečným prostředkem pro přímé stanovení GST v biologickém materiálu.
Anglicky
Poruchy metabolismu a výživy, představující jeden z klíčových problémů současné medicíny, způsobují celou řadu civilizačních onemocnění, mezi něž patří i poškození ledvin. V nedávné době bylo ukázáno, že pro přímou detekci poškození proximálních ledvinových tubulů by mohla být vhodným markerem glutathion-S-transferasa. Glutathion-S-transferasa (EC 2.5.1.18 - GST) patří do velké rodiny enzymů, které katalyzují připojení tripeptidu glutathionu (g-glutamylcysteinyl-glycin) k endogenním nebo exogenním substrátům. Glutathion připojený k hydrofobním a elektrofilním sloučeninám vytváří adukty s vyšší rozpustností ve vodě, které mohou být enzymaticky degradovány na soli merkapturových kyselin a vylučovány z organismu močí. Z hlediska renálního poškození je třeba ze čtyř tříd GST (a-GST, m-GST, p-GST a t-GST) sledovat hladinu a-GST, jejíž vzestup indikuje toto poškození. To znamená, že stanovení koncentrace a-GST v moči je senzitivní metoda pro diagnostiku renálního poškození. Bylo zjištěno, že chromatografické stanovení GST v moči není ovlivněno lékem ani změnou pH, což je pozitivním faktem pro sledování renálních funkcí u chronického ledvinového onemocnění nebo reakce ledvin po jejich transplantaci. Vedle stanovení koncentrace GST v moči pomocí HPLC byla vyzkoušena elektrochemická metoda - diferenční pulsní voltametrie doplněná technikou adsorptivního přenosu (AdT DPV). Při této technice byla GST adsorbována na různých pracovních elektrodách z malého množství pufrovaného roztoku. Registrované elektrochemické GST odezvy byly na různých pracovních elektrodách porovnávány. Bylo zjištěno, že uhlíkové elektrody poskytují velmi dobře reprodukovatelné oxidační signály tryptofanu (Trp) a tyrosinu (Tyr). Na rtuťové elektrodě (HMDE) byly pozorovány dva typy katalytických signálů GST, jednak pík H a pík odpovídající Brdičkově reakci. Na uhlíkové elektrodě byla studována závislost výšky oxidačních signálů na době akumulace a na koncentraci GST. Dá se předpokládat, že elektrochemické metody se mohou stát velmi užitečným prostředkem pro přímé stanovení GST v biologickém materiálu.
Návaznosti
| MSM 143100011, záměr |
|