2003
Detekce a lokalizace genetických determinant faktorů virulence u Staphylococcus aureus pomocí molekulárních sond
MICHALOVÁ, Eva, Vladislava RŮŽIČKOVÁ a Helena HRADECKÁZákladní údaje
Originální název
Detekce a lokalizace genetických determinant faktorů virulence u Staphylococcus aureus pomocí molekulárních sond
Název anglicky
Detection and localization of virulence factor determinants in Staphylococcus aureus using molecular probes
Autoři
MICHALOVÁ, Eva (203 Česká republika), Vladislava RŮŽIČKOVÁ (203 Česká republika, garant) a Helena HRADECKÁ (203 Česká republika)
Vydání
7. vyd. Brno, VII Pracovní setkání biochemiků a molekulárních biologů, s. 53-53, 2003
Nakladatel
Přírodovědecká fakulta Masarykovy univerzity v Brně
Další údaje
Jazyk
čeština
Typ výsledku
Stať ve sborníku
Obor
Genetika a molekulární biologie
Stát vydavatele
Česká republika
Utajení
není předmětem státního či obchodního tajemství
Kód RIV
RIV/00216224:14310/03:00009863
Organizační jednotka
Přírodovědecká fakulta
ISBN
80-210-3053-4
Klíčová slova anglicky
Staphylococcus; virulence factors; molecular probes; PCR
Štítky
Změněno: 28. 5. 2003 10:45, doc. RNDr. Vladislava Růžičková, CSc.
V originále
Alimentární enterotoxikózy, toxické epidermolýzy anebo syndrom toxického šoku jsou onemocnění způsobená toxickými exolátkami, produkovanými patogenními kmeny S. aureus. V této práci byly Southernovou hybridizací s digoxigeninem značenými molekulárními sondami, připravenými v PCR, lokalizovány sekvence genů kódujících enterotoxiny B, C1 a C2,3, exfoliatin A a termostabilní nukleázu (TN) na restrikčních spektrech HindIII a EcoRI nebo na makrorestrikčním spektru SmaI. Gen seb byl u všech SEB-pozitivních kmenů lokalizován v EcoRI spektru ve dvou kopiích na fragmentech 1,5-kb a 3,6-kb nebo 8,6-kb; v HindIII spektru pak většinou na fragmentu 6,1-kb, zatímco ve SmaI spektru se tento gen vyskytoval na různých fragmentech. Gen sec1 byl lokalizován nejčastěji na EcoRI fragmentu 8,5-kb a na HindIII fragmentu 5,0-kb. Ve SmaI spektru byl sec1 potvrzen na fragmentech ~44-kb, ~23-kb nebo ~74-kb. Gen eta byl u ETA-pozitivních kmenů většinou lokalizován na těchto fragmentech: SmaI ~200-kb, EcoRI 4,9 a 2,5-kb a na HindIII 6,2 a 4,2-kb. Gen sec2,3 byl zjištěn na větším počtu EcoRI a HindIII fragmentů a ve SmaI spektru pak nejčastěji na fragmentech ~44-kb a ~100-kb. Výskyt většího počtu signálů indikuje více kopií sekvencí genů kódujících enterotoxiny B a C. Hybridizací nebyla prokázána přítomnost genů seb, sec1 a sec2,3 na plazmidové DNA. Gen nuc, kódující termonukleázu, byl lokalizován na SmaI fragmentech ~280-kb až ~370-kb. Hybridizace kolonií umožnila detekovat přítomnost genu sec1 přímo v genomu bakterií vyrostlých v koloniích na živném agarovém médiu. Bylo prokázáno, že hybridizace genomové DNA se specifickou molekulární sondou vhodně doplňuje a upřesňuje molekulární diagnostiku virulentních kmenů S. aureus.
Anglicky
Alimentary enterotoxicoses, toxic epidermolyses or toxic shock syndrome toxin are caused by oxic exoproducts of the pathogenic strains of Staphylococcus aureus. In this paper Southern blott and hybridization with specific probes for the detection SEs (B, C;) ETA and Tnase are demostrated in the HindIII a EcoRI and SmaI macrorestriction spectra. By this method localization of the genes for these toxins were detected in staphylococcal genomes.
Návaznosti
MSM 143100008, záměr |
|