D 2003

Detekce a lokalizace genetických determinant faktorů virulence u Staphylococcus aureus pomocí molekulárních sond

MICHALOVÁ, Eva, Vladislava RŮŽIČKOVÁ a Helena HRADECKÁ

Základní údaje

Originální název

Detekce a lokalizace genetických determinant faktorů virulence u Staphylococcus aureus pomocí molekulárních sond

Název anglicky

Detection and localization of virulence factor determinants in Staphylococcus aureus using molecular probes

Autoři

MICHALOVÁ, Eva (203 Česká republika), Vladislava RŮŽIČKOVÁ (203 Česká republika, garant) a Helena HRADECKÁ (203 Česká republika)

Vydání

7. vyd. Brno, VII Pracovní setkání biochemiků a molekulárních biologů, s. 53-53, 2003

Nakladatel

Přírodovědecká fakulta Masarykovy univerzity v Brně

Další údaje

Jazyk

čeština

Typ výsledku

Stať ve sborníku

Obor

Genetika a molekulární biologie

Stát vydavatele

Česká republika

Utajení

není předmětem státního či obchodního tajemství

Kód RIV

RIV/00216224:14310/03:00009863

Organizační jednotka

Přírodovědecká fakulta

ISBN

80-210-3053-4

Klíčová slova anglicky

Staphylococcus; virulence factors; molecular probes; PCR
Změněno: 28. 5. 2003 10:45, doc. RNDr. Vladislava Růžičková, CSc.

Anotace

V originále

Alimentární enterotoxikózy, toxické epidermolýzy anebo syndrom toxického šoku jsou onemocnění způsobená toxickými exolátkami, produkovanými patogenními kmeny S. aureus. V této práci byly Southernovou hybridizací s digoxigeninem značenými molekulárními sondami, připravenými v PCR, lokalizovány sekvence genů kódujících enterotoxiny B, C1 a C2,3, exfoliatin A a termostabilní nukleázu (TN) na restrikčních spektrech HindIII a EcoRI nebo na makrorestrikčním spektru SmaI. Gen seb byl u všech SEB-pozitivních kmenů lokalizován v EcoRI spektru ve dvou kopiích na fragmentech 1,5-kb a 3,6-kb nebo 8,6-kb; v HindIII spektru pak většinou na fragmentu 6,1-kb, zatímco ve SmaI spektru se tento gen vyskytoval na různých fragmentech. Gen sec1 byl lokalizován nejčastěji na EcoRI fragmentu 8,5-kb a na HindIII fragmentu 5,0-kb. Ve SmaI spektru byl sec1 potvrzen na fragmentech ~44-kb, ~23-kb nebo ~74-kb. Gen eta byl u ETA-pozitivních kmenů většinou lokalizován na těchto fragmentech: SmaI ~200-kb, EcoRI 4,9 a 2,5-kb a na HindIII 6,2 a 4,2-kb. Gen sec2,3 byl zjištěn na větším počtu EcoRI a HindIII fragmentů a ve SmaI spektru pak nejčastěji na fragmentech ~44-kb a ~100-kb. Výskyt většího počtu signálů indikuje více kopií sekvencí genů kódujících enterotoxiny B a C. Hybridizací nebyla prokázána přítomnost genů seb, sec1 a sec2,3 na plazmidové DNA. Gen nuc, kódující termonukleázu, byl lokalizován na SmaI fragmentech ~280-kb až ~370-kb. Hybridizace kolonií umožnila detekovat přítomnost genu sec1 přímo v genomu bakterií vyrostlých v koloniích na živném agarovém médiu. Bylo prokázáno, že hybridizace genomové DNA se specifickou molekulární sondou vhodně doplňuje a upřesňuje molekulární diagnostiku virulentních kmenů S. aureus.

Anglicky

Alimentary enterotoxicoses, toxic epidermolyses or toxic shock syndrome toxin are caused by oxic exoproducts of the pathogenic strains of Staphylococcus aureus. In this paper Southern blott and hybridization with specific probes for the detection SEs (B, C;) ETA and Tnase are demostrated in the HindIII a EcoRI and SmaI macrorestriction spectra. By this method localization of the genes for these toxins were detected in staphylococcal genomes.

Návaznosti

MSM 143100008, záměr
Název: Genomy a jejich funkce
Investor: Ministerstvo školství, mládeže a tělovýchovy ČR, Genomy a jejich funkce