2005
Isolation of PCR-ready DNA from Mycobacterial cells using magnetic particles
TĚŠÍNSKÁ, Iva, Bohuslav RITTICH, Alena ŠPANOVÁ a Milan BARTOŠZákladní údaje
Originální název
Isolation of PCR-ready DNA from Mycobacterial cells using magnetic particles
Název česky
Izolace mykobakteriální DNA v kvalitě pro PCR pomocí magnetických částic
Autoři
TĚŠÍNSKÁ, Iva (203 Česká republika), Bohuslav RITTICH (203 Česká republika, garant), Alena ŠPANOVÁ (203 Česká republika) a Milan BARTOŠ (203 Česká republika)
Vydání
Pardubice, Česká republika, 11th International Symposium on Separation Sciences ISSS 2005, od s. 299-299, 1 s. 2005
Nakladatel
Univerzita Pardubice
Další údaje
Jazyk
angličtina
Typ výsledku
Stať ve sborníku
Obor
10600 1.6 Biological sciences
Stát vydavatele
Česká republika
Utajení
není předmětem státního či obchodního tajemství
Kód RIV
RIV/00216224:14310/05:00012824
Organizační jednotka
Přírodovědecká fakulta
ISBN
80-7194-771-7
Klíčová slova anglicky
Mycobacterium; DNA; PCR
Štítky
Změněno: 23. 11. 2006 08:51, doc. Ing. Bohuslav Rittich, CSc.
V originále
For this study, chicken erythrocyte DNA and calf liver RNA were used. For both types of nucleic acids, we compared the binding capacity of the following particles: non-magnetic particles based on silica, magnetic particles based on ferrite, and magnetic particles P(HEMA-co-GMA) microspheres covered with carboxylic groups. A binding buffer containing 8% PEG and 2M NaCl (final concentration) was shown to be the most appropriate combination for further studies. Separated DNA was eluted using TE buffer. The knowledge acquired was used for the development of a PCR-ready mycobacterial DNA isolation technique. Mycobacterial DNA from the eluate was detected by amplification of the dnaJ gene. The primers Multidnajf and MultidnaJr amplify a product 140 bp long. The sensitivity of the reaction is 5 . 10-3 ng/ul (5.95. 10+2 copies).
Česky
Byly stanoveny vazebné kapacity DNA z kuřecích erythrocytů a RNA z hovězích jater na následující částice: silikagel, magnetické feritové částice a magnetické P(HEMA-co-GMA)mikročástice obsahující karboxylové skupiny. Jako nejvhodnější vazebný pufr byl zjištěn 8% PEG a 2M NaCl (konečná koncentrace). Z částic byla DNA eluována pomocí TE pufru. Získané znalosti byly využity při izolaci mykobakteriální DNA v kvalitě vhodné pro PCR. Mykobakteriální DNA byla detekována amplifikací genu dnaj. Pomocí primerů Multidnajf a MultidnaJr byl amplifikován produkt o velikosti 140 bp. Citlivost stanovení byla 5,0 x 10-3 ng/ul (5,95 x 10+2 kopií buněk).
Návaznosti
| GA203/05/2256, projekt VaV |
| ||
| MZE0002716201, záměr |
|