Další formáty:
BibTeX
LaTeX
RIS
@inproceedings{621621, author = {Čejková, Darina and Šmajs, David}, address = {Brno}, booktitle = {Sborník příspěvků IX. Pracovního setkání biochemiků a molekulárních biologů}, keywords = {Treponema pallidum ssp. pallidum; regulation of gene expression}, language = {cze}, location = {Brno}, isbn = {80-210-3635-4}, pages = {5-5}, publisher = {Přírodovědecká fakulta MU}, title = {Identifikace regulátorů genové exprese u Treponema pallidum.}, year = {2005} }
TY - JOUR ID - 621621 AU - Čejková, Darina - Šmajs, David PY - 2005 TI - Identifikace regulátorů genové exprese u Treponema pallidum. PB - Přírodovědecká fakulta MU CY - Brno SN - 8021036354 KW - Treponema pallidum ssp. pallidum KW - regulation of gene expression N2 - Metodou real-time RT PCR jsme vyšetřili regulační funkci treponemálních genů rpoN (kódujícího sigma-54 faktor) a fhlA (kódujícího domnělý transkripční faktor). Tyto geny byly naklonovány do expresních plazmidů pBAD/HisB kompatibilních s replikačním systémem BAC. Exprese klonovaných genů byla regulována koncentrací arabinózy v kultivačním mediu. Vzniklé konstrukty obsahovaly izolovaně naklonované geny i plazmidy obsahující oba geny současně. Vyšetřili jsme růstovou křivku kmene DH10B s rekombinantními plazmidy za aerobních a semianaerobních podmínek Za neindukovaných aerobních podmínek roste kmen nesoucí konstrukt s oběma geny rpoN a fhlA výrazně pomaleji než ostatní vzorky. Po indukci arabinózou pozorujeme pomalejší růst u všech kmenů E. coli nesoucí geny rpoN a fhlA a také u kmene nesoucího konstrukt s oběma geny rpoN a fhlA. Protože T. pallidum nelze kultivovat v podmínkách in vitro, expresi treponemálních genů jsme monitorovali v 19 klonech BAC knihovny T. pallidum v E. coli DH10B. Konstrukty s geny rpoN a fhlA byly transformovány do E. coli DH10B s kosmidy DSTP147 a DSTP085. Z těchto kmenů byla izolována RNA 60 a 120 minut po indukci arabinózou a hladina transkriptů vyšetřena kvantitativní RT PCR. Nejvíce jsou regulovány geny TP 9 (tprA), TP 28 (předpovězený gen pro hemolysin), TP 30 (groEL), TP 1037 (hlyIII) a TP 1038 (TpF1). Regulační proteiny RpoN a FhlA přitom spolupracují na pozitivní regulaci transkripce těchto genů. ER -
ČEJKOVÁ, Darina a David ŠMAJS. Identifikace regulátorů genové exprese u Treponema pallidum. In \textit{Sborník příspěvků IX. Pracovního setkání biochemiků a molekulárních biologů}. Brno: Přírodovědecká fakulta MU, 2005, s.~5. ISBN~80-210-3635-4.
|