Další formáty:
BibTeX
LaTeX
RIS
@article{638229, author = {Mikelová, Radka and Adam, Vojtěch and Trnková, Libuše and Kizek, René}, article_number = {3}, keywords = {Sensor; Biosenzor; DNA; Oligonucleotid; Elimination voltammetry with linear scan;}, language = {cze}, issn = {0008-7335}, journal = {Časopis lékařů českých}, title = {Vyuziti eliminacni voltametrie pro analyzu nukleovych kyselin}, volume = {145}, year = {2006} }
TY - JOUR ID - 638229 AU - Mikelová, Radka - Adam, Vojtěch - Trnková, Libuše - Kizek, René PY - 2006 TI - Vyuziti eliminacni voltametrie pro analyzu nukleovych kyselin JF - Časopis lékařů českých VL - 145 IS - 3 SP - 233-233 EP - 233-233 SN - 00087335 KW - Sensor KW - Biosenzor KW - DNA KW - Oligonucleotid KW - Elimination voltammetry with linear scan; N2 - Od popsání struktury DNA uplynulo více jako 50 let, avšak DNA zůstává stále jednou z nejstudovanějších biologických molekul. O tomto faktu svědčí, že v roce 2004 bylo publikováno více než 30 tis článků věnujících se studiu DNA. V analýze DNA se uplatňuje celá řada metod a postupů. V současné době stále nejvíce využívanou metodou detekce DNA je elektroforetická separace na agarózových a nebo polyakrylamidových gelech. Moderní technologie umožnily rozpoznání sekvence genomů řady organismů včetně člověka a nyní jsou takto získané poznatky aplikovány do studia lidských nemocí a zdraví. Je potřebné hledat nové postupy umožňující rychlou a senzitivní analýzu DNA. Možnou alternativu představují elektrochemické metody. Elektrochemické chování nukleových kyselin poprvé publikoval Paleček v roce 1960 v časopise Nature. Od té doby je problematice elektroanalýzy nukleových kyselin věnována značná pozornost. Elektrochemie dnes nabízí postupy v oblasti konstrukce levných a rychlých biosenzorů. Navrhované biosenzory jsou navrhovány pro detekci řady závažných genetických, ale i na genech závislých onemocnění (jako například nádorová onemocnění). Nedávno byla eliminační voltametrie úspěšně použita pro senzitivní analýzu nukleových kyselin. V našich experimentech bylo elektrochemické měření uskutečněno na přístroji AUTOLAB (EcoChemie, Holandsko) ve spojení s VA-Stand 663 (Metrohm, Švýcarsko). Pomocí eliminační voltametrie byl zkoumán vliv změny obsahu purinových a pyrimidinových bází v řetězci DNA. Byl sestaven nový EVLS DNA biosenzor, založeným na technice adsorptivní přenosové rozpouštěcí voltametrie (AdTSV) a eliminační voltametrie s lineárním scanem (EVLS). V našich experimentech byla DNA adsorbována (5 ľl) na povrch pracovní visící rtuťové kapkové elektrody po dobu 240 s. Všechny nízkomolekulární a neadsorbované molekuly DNA byly z povrchu pracovní elektrody odstraněny oplachem v destilované vodě a použitém pufru. Pro tento účel jsme zvolili sérii oligonukleotidů (ODNs), které měly ve své primární struktuře různý počet bází. V dalších experimentech byla sledována závislost elektrochemického signálu ODNs na měnící se rychlosti polarizace (5, 10, 25, 50, 100, 200, 400, 800, 1 400 a 2 400 mV/s). Pomocí námi vyvinutých unikátních postupů bylo možné rozlišit změny v primární struktuře DNA s ohledem na záměnu jediné nukleotidové báze v řetězci DNA. Použitý postup umožnil stanovit DNA ve velmi nízkých koncentracích v řádech desítek nM. Elektrochemická analýza DNA stále představuje vhodný nástroj pro konstrukci jednoduchých, spolehlivých a přitom velice levných zařízení. ER -
MIKELOVÁ, Radka, Vojtěch ADAM, Libuše TRNKOVÁ a René KIZEK. Vyuziti eliminacni voltametrie pro analyzu nukleovych kyselin. \textit{Časopis lékařů českých}. 2006, roč.~145, č.~3, s.~233-233. ISSN~0008-7335.
|