Utilisation of immunochemical methods for detection of Colletotrichum spp. in strawberry

KRÁTKÁ, J., I. KUDLÍKOVÁ, B. PEKÁROVÁ-KYNĚROVÁ, J. SLOVÁČEK and M. ZEMÁNKOVÁ. Utilisation of immunochemical methods for detection of Colletotrichum spp. in strawberry. Ochrana rostlin. Praha: Ústav zemědělských a potravinářských inf, 2002, vol. 38, No 2, p. 55-63. ISSN 1212-258.

Basic information

• Original name: Utilisation of immunochemical methods for detection of Colletotrichum spp. in strawberry
• Name in Czech: Použití imunochemických metod ke stanovení Colletotrichum spp. v jahodníku.
• Authors: KRÁTKÁ, J., I. KUDLÍKOVÁ, B. PEKÁROVÁ-KYNĚROVÁ, J. SLOVÁČEK and M. ZEMÁNKOVÁ.
• Edition: Ochrana rostlin, Praha, Ústav zemědělských a potravinářských inf, 2002, 1212-258.

Other information

• Type of outcome: Article in a journal
• Confidentiality degree: is not subject to a state or trade secret
• Organization unit: Faculty of Science
• Keywords in English: Colletotrichum acutatum; strawberry; pathogenicity; polyclonal antibodies; monoclonal antibodies; PTA-ELISA; immunoprint; dot blot;immunofluorescent microscopy
• Tags: Colletotrichum acutatum, dot blot, immunofluorescent microscopy, immunoprint, monoclonal antibodies, pathogenicity, polyclonal antibodies, PTA-ELISA, strawberry

Abstract

Four polyclonal and two monoclonal antibodies were prepared and tested to detect a quarantine pathogen of strawberry Colletotrichum acutatum. Only one of them, polyclonal IgG K91, was sensitive enough to recognize the pathogen. This antibody was genus-specific and did not cross-react with several other fungal pathogens of strawberry (Phytophthora fragariae, P. cactorum, Verticillium albo-atrum, Botrytis cinerea, Pythium ultimum). Four techniques, PTA-ELISA, dot blot, immunoprint and immunofluorescent microscopy were used to test the specifity and sensitivity of antibodies. After artificial infection of strawberry (cvs Elsanta, Vanda, and Kama), Colletotrichum acutatum was detected by PTA-ELISA, dot blot and immunoprint in roots, crowns, petioles and fruits in the latent stage of the disease. For reliable detection in the latent stage it is recommended to use at least two of the mentioned techniques.

Abstract (in Czech)

Byly připraveny čtyři polyklonální a dvě monoklonální protilátky pro detekci Colletotrichum acutatum, karanténního patogena jahodníku. Pouze jedna polyklonální protilátka, IgG K91, byla dostatečně vhodná k identifikaci patogena v hostiteli. Tato protilátka je rodově specifická a nevykazuje křížové reakce s dalšími houbovými patogeny jahodníku (Phytophthora fragariae, P. cactorum, Verticillium albo-atrum, Botrytis cinerea, Pythium ultimum). Pro testování specifity a citlivosti protilátek byly použity čtyři techniky: PTA-ELISA, dot blot, imunoprint a imunofluorescence. Po umělé infekci bylo Colletotrichum acutatum detekováno v jahodníku (odrůdy Elsanta, Vanda a Kama) v latentním stadiu onemocnění v kořenech, kořenových krčcích, řapících a plodech pomocí PTA-ELISA, dot blotu a imunoprintu. Pro bezpečnou detekci patogena v latentním stadiu je doporučeno použít alespoň dvě imunotechniky.