Utilization of immunochemical methods to detect Phytophthora fragariae in strawberry plants.

PEKÁROVÁ, B., J. KRÁTKÁ a J. SLOVÁČEK. Utilization of immunochemical methods to detect Phytophthora fragariae in strawberry plants. Ochrana rostlin. Praha: Ústav zemědělských a potravinářských inf, 2001, roč. 37, č. 2, s. 57-65. ISSN 1212-2580.

Základní údaje

• Originální název: Utilization of immunochemical methods to detect Phytophthora fragariae in strawberry plants.
• Název česky: Využití imunochemických metod k detekci Phytophthora fragariae v rostlinnách jahodníku.
• Autoři: PEKÁROVÁ, B., J. KRÁTKÁ a J. SLOVÁČEK.
• Vydání: Ochrana rostlin, Praha, Ústav zemědělských a potravinářských inf, 2001, 1212-2580.

Další údaje

• Typ výsledku: Článek v odborném periodiku
• Utajení: není předmětem státního či obchodního tajemství
• Organizační jednotka: Přírodovědecká fakulta
• Klíčová slova anglicky: Phytophthora fragariae; polyclonal and monoclonal antibodies; PTA-ELISA; immunoprinting; dot blot; strawberry
• Štítky: dot blot, immunoprinting, Phytophthora fragariae, polyclonal and monoclonal antibodies, PTA-ELISA, strawberry

Anotace

Polyclonal antibodies anti-PfP IgG and anti-PfM IgG and monoclonal antibody MAb29were prepared to detect a quarantine pathogen of strawberry, Phytophthora fragariae. Laboratory rabbits and mice were immunized using purified and unpurified protein extracts from the mycelial mass of the pathogen. Except for Pythium ultimum, the antibodies did not cross-react with other pathogenic fungi, such as Botrytis cinerea, Colletotrichum acutatum, Fusarium sp.,Verticillium albo-atrum. PTA-ELISA was used to test the antibodies. P. fragariae was detected in artificially infected strawberries (cultivars Elsanta, Kama, Vanda) by means of PTA-ELISA, immunoprinting and dot blot. Detection of the pathogen was optimal in undamaged roots or roots with necrotic tips only. At a later stage of infection, when whole roots were necrotic, the crown was more suitable for successful detection. To detect P. fragariae at the early stages of infection it is recommended to use at least two of the three mentioned immunotechniques.

Anotace česky

K detekci karanténního patogenu Phytophthora fragariae byly připraveny a otestovány polyklonální protilátky anti-PfP IgG a anti-PfM IgG a monoklonální protilátka MAb29. K imunizaci laboratorních králíků a myší byl použit purifikovaný nebo nepurifikovaný proteinový extrakt z myceliální hmoty patogenu. Všechny připravené protilátky jsou rodově specifické. Křížové reakce nebyly zjištěny s patogenními houbami r. Fusarium, Verticillium albo-atrum, Colletotrichum acutatum, Botrytis cinerea, Trichoderma sp. Gliocladium sp. Všechny připravené protilátky mají křížové reakce s houbou Pythium sp. Pro testování protilátek byla použita PTA-ELISA. V jahodníku (odr. Elsanta, Kama, Vanda) byla Phytophthora fragariae detekována pomocí PTA-ELISA, imunoprintu a dot blot. Detekce patogenu je optimální v nepoškozených kořenech, příp. v kořenech s nekrotizovanými špičkami. Při větší nekrotizaci kořene je lépe stanovit přítomnost houby v kořenovém krčku. Při sledování infekce jahodníku v počátečních fázích doporučujeme použít alespoň dvě z jmenovaných imunotechnik. Všechna sledování byla prováděna na uměle infikovaném rostlinném materiálu.