2006
Evaluation of CD34+ - and Lin- -selected cells from peripheral blood stem cell grafts of patients with lymphoma during differentiation in culture ex vivo using a cDNA microarray technique
KOUTNÁ, Irena, Martin KLABUSAY, Viera HRABČÁKOVÁ, Petr KRONTORÁD, Zbyněk SVOBODA et. al.Základní údaje
Originální název
Evaluation of CD34+ - and Lin- -selected cells from peripheral blood stem cell grafts of patients with lymphoma during differentiation in culture ex vivo using a cDNA microarray technique
Název česky
Analýza CD34+ a Lin- kmenových buněk z periferních krve pacientů s lymfomem během ex vivo diferenciace v kultuře pomocí techniky DNA microarray
Autoři
KOUTNÁ, Irena (203 Česká republika, garant), Martin KLABUSAY (203 Česká republika), Viera HRABČÁKOVÁ (703 Slovensko), Petr KRONTORÁD (203 Česká republika), Zbyněk SVOBODA (203 Česká republika), Michal KOZUBEK (203 Česká republika) a Jiří MAYER (203 Česká republika)
Vydání
Experimental hematology, Netherlands, Elsevier Science Inc, 2006, 0301-472X
Další údaje
Jazyk
angličtina
Typ výsledku
Článek v odborném periodiku
Obor
30200 3.2 Clinical medicine
Stát vydavatele
Nizozemské království
Utajení
není předmětem státního či obchodního tajemství
Impakt faktor
Impact factor: 3.408
Kód RIV
RIV/00216224:14330/06:00016104
Organizační jednotka
Fakulta informatiky
UT WoS
000238747100003
Klíčová slova anglicky
Hematopoietic stem cells; hematopoietic transplantation; cytokines; ex vivo expansion; immunomagnetic separation
Štítky
Příznaky
Mezinárodní význam, Recenzováno
Změněno: 12. 12. 2006 10:39, doc. RNDr. Irena Koutná, Ph.D.
V originále
Objective. Hematopoietic stem cells (enriched in fraction of CD34+ cells) have the ability to regenerate hematopoiesis in all of its lineages, and this potential is clinically used in transplanting bone marrow or peripheral blood stem cells. Our objective was to assemble a suitable method for evaluating gene expression in enriched populations of hematopoietic stem cells. We compared biologic properties of cells cultured ex vivo obtained using two different ways of immunomagnetic separation (positive selection of CD34+ cells and negative selection of Lin2 cells) by means of a cDNA microarray technique. Methods. CD34+ and Lin2 cells were enriched from peripheral blood stem cell (PBSCs) grafts of patients with non-Hodgkins lymphoma. Isolated cells were in the presence of cytokine PBSCs, FLT-3 ligand, interleukin-3, interleukin-6, and granulocyte colony-stimulating factor. At days 0, 4, 6, 8, 10, 12, and 14 cells were harvested and analyzed by cDNA microarrays. Total cell expansion, CD34+, colony-forming unit for granulocyte-macrophage and megakaryocytes expansion, vitality, and phenotype of cells were also analyzed. Results. cDNA microarray analysis of cultured hematopoietic cells proved equivalence of the two enrichment methods for PBSC samples and helped us characterize differentiating cells cultured ex vivo. Conclusion. Our methodologic approach is helpful in characterizing cultured hematopoietic cells cultured ex vivo, but it is also suitable for more general purposes. Equivalence of CD34+ and Lin2 selection methods from PBSC samples proved by cDNA microarray may have an implication for graft manipulation in an experimental setting of hematopoietic transplantation. Total cell expansion and colony formation and phenotype from CD34+ selected and from Lin2 samples were comparable.
Česky
Cíl. Hematopoetické kmenové buňky (frakce CD34+) mají schopnost diferencovat do všech typů krevních buněk a tato schopnost je využívána při transplantacích kostí dřeně a kmenových buněk z periferní krve. Naším cílem bylo vypracovat vhodnou metodu pro stanovení genové exprese v populacích hematopoetických kmenových buněk. Technikou cDNA microarrays jsme porovnávali biologické vlastnosti buněk kultivovaných ex vivo, které byly získány za použití dvou rozdílných metod imunomagnetické separace (pozitivní selekce CD34+ buněk a negativní selekce Lin-). Metody. CD34+ a Lin- buňky jsme izolovali z kmenových buněk z periferní krve (PBSCs) pacientů s non-Hodkingovým lymfomem. Buňky byly vystaveny působení cytokinu PBSCs, FLT-3 ligandu, interleukinu-3, interleukinu-6 a granulocytárnímu faktoru stimulujícímu kolonie. Odběry a analýza buněk na cDNA microarrays proběhly ve dnech 0, 4, 6, 8, 10, 12 a 14. Byla též analyzována totální buněčná expanze, CD34+, colony-forming unit pro granulocyt-makrofágovou a megakaryocytovou expanzi, vitalita a fenotyp buněk. Výsledky. cDNA microarray analýza hematopoetických buněk prokázala rovnocennost obou metod u PBSC vzorků a pomohla charakterizovat diferenciaci buněk pěstovaných ex vivo. Závěr. Náš postup je vhodný pro charakterizaci hematopoetických kmenových buněk pěstovaných ex vivo, ale také k obecnějším účelům. Rovnocennost CD34+ a Lin- selekčních metod u PBSC vzorků, potvrzená cDNA microarrays, by mohla nalézt uplatnění při manipulacích se štěpy při hematopoetických transplantacích. Totální buněčná expanze, utváření kolonií a fenotyp byl u CD34+ a Lin- vzorků srovnatelný.
Návaznosti
| GP301/04/P136, projekt VaV |
| ||
| 1A8241, projekt VaV |
|