Benzophenanthridine alkaloids as a new supravital DNA dyes.

SLANINOVÁ, Iva, Jiří ŠINKORA a Eva TÁBORSKÁ. Benzophenanthridine alkaloids as a new supravital DNA dyes. In Sborník XIV. Cytoskeletálního klubu. Praha: Československá biologická společnost, 2006, s. 20-20.

Základní údaje

Originální název

Benzophenanthridine alkaloids as a new supravital DNA dyes.

Název česky

Benzofenantridinové alkaloidy - nové supravitální DNA barviva.

Autoři

SLANINOVÁ, Iva, Jiří ŠINKORA a Eva TÁBORSKÁ

Vydání

Praha, Sborník XIV. Cytoskeletálního klubu, od s. 20-20, 1 s. 2006

Nakladatel

Československá biologická společnost

---

Další údaje

Jazyk

angličtina

Typ výsledku

Stať ve sborníku

Obor

Genetika a molekulární biologie

Stát vydavatele

Česká republika

Utajení

není předmětem státního či obchodního tajemství

Organizační jednotka

Lékařská fakulta

Klíčová slova anglicky

benzophenanthridine alkaloids; DNA dye; flow cytometry; fluorescence microscopy; multicolor analysis; cell cycle

Štítky

Benzophenanthridine Alkaloids, cell cycle, DNA dye, flow cytometry, fluorescence microscopy, multicolor analysis

Příznaky

Mezinárodní význam

---

Anotace

V originále

We have proved that macarpine (MA) and chelirubine (CHR) can be used as supravital fluorescent DNA probes both in fluorescence microscopy and flow cytometry. MA and CHR are quaternary benzo[c]phenanthridine alkaloids (QBA), that are naturally occurring products with noteworthy antiproliferative activity and fluorescence characteristics. QBA are commonly isolated from plants of Fumariaceae, Papaveraceae, Ranunculaceae and Rutaceae families. When added to intact cell suspensions, water stock solutions of the alkaloids (MA, CHR) stain the cells upon brief (in seconds) incubation at low final concentration (0,01-0,001 mg/ml). We have also evaluated the convenience of these minor QBA as supravital nucleic acid probes for time effective multiparameter immunophenotyping of peripheral blood and bone marrow leukocytes. Heparinized peripheral blood or bone marrow aspirate cells were stained on the surface with a combination of fluorochrome-conjuagted monoclonal antibodies directed against surface markers. Then, an appropriate amount of individual QBA was added and, upon dilution, the samples were acquired on a standard (FACSCalibur) or polychromatic (CyAn) flow cytometer. Our results show that spectral characteristics of individual QBA allow for simultaneous surface immunophenotyping and semiquantitative DNA determination. MA and CHR are excitable by common argon lasers (488 nm) emmiting at the range 575 - 750 nm (i.e. fluorescence channels 2-5). Fluorescence channels 1 and 5 – 7 are available for surface immunophenotyping on FACSCalibur and CyAn, respectively.

Česky

Bylo zjištěno, že benzophenantridinové alkaloidy makarpin, celirubin a sanguinarin jsou využitelné pro značení DNA u živých nepermeabilizovaných buněk. Makarpinu je navích schopen vázat DNA stochiometricky a tím je možné rozlišit fáze buněčného cyklu. Využití makarpinu je ve fluorescenčni mikroskopii pro studium struktury jádra, v prutokové cytometrii - odlišení jaderných buněk i pri mnohobarevném značení v kombinaci se značením jiných znaků např. protilátkami značenými FITC a studium fází buněčného cyklu.

---

Návaznosti

GA525/04/0017, projekt VaV	Název: Rostlinné zdroje benzofenanthridinových alkaloidů a účinek těchto alkaloidů na normální a nádorové buňky Investor: Grantová agentura ČR, Rostlinné zdroje benzofenanthridinových alkaloidů a účinek těchto alkaloidů na normální a nádorové buňky
MSM0021622415, záměr	Název: Molekulární podstata buněčných a tkáňových regulací Investor: Ministerstvo školství, mládeže a tělovýchovy ČR, Molekulární podstata buněčných a tkáňových regulací