J 2006

Isolation of polymerase chain reaction-ready bacterial DNA from Lake Baikal sediments by carboxyl-functionalised magnetic polymer microspheres

ŠPANOVÁ, Alena, Bohuslav RITTICH, Igor ŠTYRIAK, Iveta ŠTYRIAKOVÁ, Daniel HORÁK et. al.

Základní údaje

Originální název

Isolation of polymerase chain reaction-ready bacterial DNA from Lake Baikal sediments by carboxyl-functionalised magnetic polymer microspheres

Název česky

Izolace DNA v kvalitě vhodné pro PCR ze sedimentů Bajkalského jezera pomocí magnetických pomerních částic funkcionalizovaných karboxylovými skupinami

Autoři

ŠPANOVÁ, Alena (203 Česká republika, garant), Bohuslav RITTICH (203 Česká republika), Igor ŠTYRIAK (703 Slovensko), Iveta ŠTYRIAKOVÁ (703 Slovensko) a Daniel HORÁK (203 Česká republika)

Vydání

Journal of Chromatography A, Amsterdam, Elsevier, 2006, 0021-9673

Další údaje

Jazyk

angličtina

Typ výsledku

Článek v odborném periodiku

Obor

10600 1.6 Biological sciences

Stát vydavatele

Nizozemské království

Utajení

není předmětem státního či obchodního tajemství

Impakt faktor

Impact factor: 3.554

Kód RIV

RIV/00216224:14310/06:00016161

Organizační jednotka

Přírodovědecká fakulta

UT WoS

000241092300014

Klíčová slova anglicky

Magnetic microspheres; P(HEMA-co-EDMA); Lake Baikal sediments; Microbial DNA Magnetic separation; Polymerase chain reaction (PCR)

Příznaky

Mezinárodní význam, Recenzováno
Změněno: 19. 12. 2006 16:50, doc. Ing. Bohuslav Rittich, CSc.

Anotace

V originále

Carboxyl group-containing magnetic nonporous poly(2-hydroxyethyl methacrylate-co-ethylene dimethacrylate) (P(HEMA-co-EDMA)) microspheres were used for the isolation of polymerase chain reaction(PCR)-ready DNA from samples of Baikal sediments. The occurence of false -negative results in PCR caused by the presence of extracelular inhibitors in DNA samples was solved using solid phase reversible DNA immobilisation. PCR-ready DNA was reversibly adsorbed to the microspheres in the presence of 8.0% PEG 6000 and 2.0 M sodium chloride concentrations. The adsorbed DNA was released from the microspheres in a low ioninic strength TE buffer. The quality of isolated DNA was checked by PCR amplification.

Česky

Magnetické neporézní poly(2-hydroxyethyl methakrylát-co-ethylen dimethakrylát) (P(HEMA-co-EDMA)) mikročástice byly použity k izolaci DNA z bajkalských sedimentů v kvalitě vhodné pro PCR. Výskyt falešně negativních výsledků v PCR byl způsoben přítomností extracelulárních inhibitorů ve vzorcích DNA. K jejich odstranění byla použita metoda reversibilní imobilizace DNA. DNA byla reversibilně adsorbována na mikročástice v přítomnosti 8,0% PEG 6000 a 2,0 m NaCl. Adsorbovaná DNA byla eluována TE pufrem o nízké iontové síle. Kvalita izolované DNA byla ověřována pomocí PCR.

Návaznosti

GA203/05/2256, projekt VaV
Název: Magnetické hydrofilní polymerní mikročástice reagující na vnější stimuly pro lékařství a bioinženýrství
Investor: Grantová agentura ČR, Magnetické hydrofilní polymerní mikročástice reagující na vnější stimuly pro lékařství a bioinženýrství