D 2007

Cytochrome P450 2C9 Activity Study by Micellar Electrokinetic Capillary Chromatography (Lecture)

KONEČNÝ, Jiří a Zdeněk GLATZ

Základní údaje

Originální název

Cytochrome P450 2C9 Activity Study by Micellar Electrokinetic Capillary Chromatography (Lecture)

Název česky

Stanovení aktivity cytochromu P450 2C9 pomocí MEKC (Přednáška)

Autoři

KONEČNÝ, Jiří a Zdeněk GLATZ

Vydání

Olomouc, Book of Abstracts, od s. 98-98, 1 s. 2007

Nakladatel

Palacký University Olomouc

Další údaje

Jazyk

angličtina

Typ výsledku

Stať ve sborníku

Obor

10406 Analytical chemistry

Stát vydavatele

Česká republika

Utajení

není předmětem státního či obchodního tajemství

Organizační jednotka

Přírodovědecká fakulta

ISBN

978-80-244-1705-9

Klíčová slova anglicky

assymetric dimethylarginine; HPLC

Příznaky

Mezinárodní význam
Změněno: 19. 5. 2009 18:44, prof. RNDr. Zdeněk Glatz, CSc.

Anotace

V originále

Cytochromes P45O are involved in a wide variety of metabolic and biosynthetic processes encompassing drug metabolism. Cytochrome P450 2C9 (CYP2C9) is one of the most important isoform in human liver involved in the metabolism of a large number of therapeutic agents. Predominantly high performance liquid chromatography (HPLC) with UV and/or fluorescence detection is chosen for these studies. By reason of sample saving and minor time demands, the possibility of automation, CE analysis is suitable for studies comprising work with enzymes, substrates as well as inhibitors. The applicability of capillary electrophoresis (CE) for the determination of enzymatic activity of CYP2C9 with diclofenac as a probe substrate is demonstrated. Micellar electrokinetic capillary chromatography (MEKC) with SDS as a pseudostationary phase was used for this purpose. The kinetic study on the given enzymatic reaction was also performed since basic characterization of drug biotransformation generally begins with the enzyme kinetic analysis of metabolite formation. As a result Michaelis constant and maximum reaction velocity were evaluated, the values 3.44 uM respectively 19.78 nmol.min-1.nmol-1 were in agreement with the literature data. Moreover, the proposed method is suitable for assessing of substrate inhibition study using sulfaphenazole as an inhibitor of CYP2C9 activity. As a result the IC50 value for sulfaphenazole was determinated 0.29 uM which is in consistence with those reported in literature.

Česky

Byla vypracována metoda stanovení aktivity cytochromu P450 2C9 pomocí MEKC.

Návaznosti

GA203/06/0047, projekt VaV
Název: Využití kapilární elektroforézy pro studium metabolismu léčiv
Investor: Grantová agentura ČR, Využití kapilární elektroforézy pro studium metabolismu léčiv
LC06023, projekt VaV
Název: Integrované bioanalytické technologie pro mikroanalýzy a diagnostiku s využitím LIF a hmotnostní spektrometrie
Investor: Ministerstvo školství, mládeže a tělovýchovy ČR, Integrované bioanalytické technologie pro mikroanalýzy a diagnostiku s využitím LIF a hmotnostní spektrometrie
MSM0021622413, záměr
Název: Proteiny v metabolismu a při interakci organismů s prostředím
Investor: Ministerstvo školství, mládeže a tělovýchovy ČR, Proteiny v metabolismu a při interakci organismů s prostředím