J 2007

Spectrometric and voltammetric analysis of urease. Nickel nanoelectrode as an electrochemical sensor

HUBÁLEK, Jaromír, Jan HRADECKÝ, Vojtěch ADAM, Olga KRYŠTOFOVÁ, Dalibor HÚSKA et. al.

Základní údaje

Originální název

Spectrometric and voltammetric analysis of urease. Nickel nanoelectrode as an electrochemical sensor

Název česky

Spektrometrická a voltametrická analýza ureázy. Niklová nanoelektroda jako elektrochemický sensor

Autoři

HUBÁLEK, Jaromír (203 Česká republika), Jan HRADECKÝ (203 Česká republika), Vojtěch ADAM (203 Česká republika), Olga KRYŠTOFOVÁ (203 Česká republika), Dalibor HÚSKA (203 Česká republika), Michal MASAŘÍK (203 Česká republika), Libuše TRNKOVÁ (203 Česká republika), Aleš HORNA (203 Česká republika), Kateřina KLOSOVÁ (203 Česká republika), Martin ADÁMEK (203 Česká republika), Josef ZEHNÁLEK (203 Česká republika) a René KIZEK (203 Česká republika, garant)

Vydání

Sensors, Basel, Switzerland, MDPI, 2007, 1424-8220

Další údaje

Jazyk

angličtina

Typ výsledku

Článek v odborném periodiku

Obor

10405 Electrochemistry

Stát vydavatele

Švýcarsko

Utajení

není předmětem státního či obchodního tajemství

Impakt faktor

Impact factor: 1.573

Kód RIV

RIV/00216224:14110/07:00019452

Organizační jednotka

Lékařská fakulta

UT WoS

000248319500013

Klíčová slova anglicky

urease; electrochemical methods; nanotechnology; nanotube; nickel electrode; hanging mercury drop electrode; spectrometry

Příznaky

Recenzováno
Změněno: 25. 6. 2009 10:45, prof. RNDr. Michal Masařík, Ph.D.

Anotace

V originále

Urease is the enzyme catalyzing the hydrolysis of urea into carbon dioxide and ammonia. This enzyme is substrate-specific, which means that the enzyme catalyzes the hydrolysis of urea only. This feature is a basic diagnostic criterion used in the determination of many bacteria species. Most of the methods utilized for detection of urease are based on analysis of its enzyme activity, the hydrolysis of urea. The aim of this work was to detect urease indirectly by spectrometric method and directly by voltammetric methods. As spectrometric method we used is called indophenol assay. The sensitivity of detection itself is not sufficient to analyse the samples without pre-concentration steps. Therefore we utilized adsorptive transfer stripping technique coupled with differential pulse voltammetry to detect urease. The influence of accumulation time, pH of supporting electrolyte and concentration of urease on the enzyme peak height was investigated. Under the optimized experimental conditions (0.2 M acetate buffer pH 4.6 and accumulation time of 120 s) the detection limit of urease evaluated as 3 S/N was 200 ng/ml. The activity of urease enzyme depends on the presence of nickel. Thus the influence of nickel(II) ions on electrochemical response of the enzyme was studied. Based on the results obtained the interaction of nickel(II) ions and urease can be determined using electrochemical methods. Therefore we prepared Ni nanoelectrodes to measure urease. The Ni nanoelectrodes was analysed after the template dissolution by scanning electron microscopy. The results shown vertically aligned Ni nanopillars almost covered the electrode surface, whereas the defect places are minor and insignificant in comparison with total electrode surface. We were able to not only detect urease itself but also to distinguish its native and denatured form.

Česky

Ureáza je enzym katalyzující přeměnu močoviny na oxid uhličitý a amoniak. Ureáza je substrátově specifická, což znamená, že katalyzuje přeměnu pouze ureázy. Tato schopnost je základním diagnostickým kritériem používaným pro stanovení mnoha bakteriálních druhů. Metoda, která se využívá pro stanovení ureázy je založena na detekci její aktivity, intenzity hydrolýzy močoviny. Cílem této práce je nepřímé stanovení ureázy pomocí spektrometrických a elektrochemických metod.

Návaznosti

IAA401990701, projekt VaV
Název: Studium vazby platinových cytostatik do struktury DNA; Vliv metalothioneinu
MSM0021630503, záměr
Název: Nové trendy v mikroelektronických systémech a nanotechnologiích (MIKROSYN)
1QS201710508, projekt VaV
Název: Impedimetrické chemické mikrosenzory s nanomechanizovaným povrchem elektrod