2007
CE separation of proteins and yeasts dynamically modified by PEG pyrenebutanoate with fluorescence detection.
HORKÁ, Marie, Filip RŮŽIČKA, Veronika HOLÁ a Karel ŠLAISZákladní údaje
Originální název
CE separation of proteins and yeasts dynamically modified by PEG pyrenebutanoate with fluorescence detection.
Název česky
CE separace proteinů a kvasinek, dynamicky modifikovaných PEG pyrenebutanoátem, s fluorescenční detekcí
Autoři
HORKÁ, Marie (203 Česká republika), Filip RŮŽIČKA (203 Česká republika, garant), Veronika HOLÁ (203 Česká republika) a Karel ŠLAIS (203 Česká republika)
Vydání
Electrophoresis, Germany, WILEY-VCH Verlag GmbH&Co. KGaA, 2007, 0173-0835
Další údaje
Jazyk
angličtina
Typ výsledku
Článek v odborném periodiku
Obor
10406 Analytical chemistry
Stát vydavatele
Německo
Utajení
není předmětem státního či obchodního tajemství
Impakt faktor
Impact factor: 3.609
Kód RIV
RIV/00216224:14110/07:00024145
Organizační jednotka
Lékařská fakulta
UT WoS
000248190400022
Klíčová slova anglicky
capillary isoelectric focusing; capillary electrophoresis; separation; proteins; yeasts; pyrenebutanoate
Štítky
Příznaky
Mezinárodní význam, Recenzováno
Změněno: 25. 6. 2009 10:13, prof. MUDr. Filip Růžička, Ph.D.
V originále
The optimized protocols of the bioanalytes separation, proteins and yeasts, dynamically modified by the nonionogenic tenside PEG pyrenebutanoate, were applied in CZE and CIEF with the acidic gradient in pH range 2-5.5, both with fluorescence detection. PEG pyrenebutanoate was used as a buffer additive for a dynamic modification of proteins and/or yeast samples. The narrow peaks of modified analytes were detected. The values of the pI's of the labeled proteins were calculated using new fluorescent pI markers in CIEF and they were found to be comparable with pI's of the native compounds. As an example of the possible use of the suggested CIEF technique, the mixed cultures of yeasts, Candida albicans, Candida glabrata, Candida kefyr, Candida krusei, Candida lusitaniae, Candida parapsilosis, Candida tropicalis, Candida zeylanoides, Geotrichum candidum, Saccharomyces cerevisiae, Trichosporon asahii and Yarrowia lipolytica, were reproducibly focused and separated with high sensitivity. Using UV excitation for the on-column fluorometric detection, the minimum detectable amounts of analytes, femtograms of proteins and down to ten cells injected on the separation capillary, were estimated.
Česky
Optimalizované protokoly separace bioanalytů, proteinů a kvasinek, dynamicky upravených neionogením tenziden pyren-máselnou kyselinou, byly použity při CZE a CIEF s kyselým gradientem v pH oblasti 2 - 5.5. Použití těchto technik bylo s úspěchem ověřeno na separaci a identifikaci jednotlivých mikrobů ze směsných kultur kvasinek (Candida albicans, Candida glabrata, Candida kefyr, Candida krusei, Candida lusitaniae, Candida parapsilosis, Candida tropicalis, Candida zeylanoides, Geotrichum candidum, Saccharomyces cerevisiae, Trichosporon asahii and Yarrowia lipolytica). Používání UV excitace pro on-column fluorimetrickou detekci umožňuje detekovat jednotlivé kvasinkové buňky i minimální množství analytu (femtogramy).
Návaznosti
| IAAX00310701, projekt VaV |
|