2008
Comparative study of mouse and human feeder cells for human embryonic stem cells
EISELLEOVÁ, Lívia; Iveta PETERKOVÁ; Jakub NERADIL; Iva SLANINOVÁ; Aleš HAMPL et. al.Basic information
Original name
Comparative study of mouse and human feeder cells for human embryonic stem cells
Name in Czech
Srovnávací studie myších a lidských podpůrných buněk pro kultivaci lidských embryonálních kmenových buněk
Authors
EISELLEOVÁ, Lívia (703 Slovakia, guarantor); Iveta PETERKOVÁ (203 Czech Republic); Jakub NERADIL (203 Czech Republic); Iva SLANINOVÁ (203 Czech Republic); Aleš HAMPL (203 Czech Republic) and Petr DVOŘÁK (203 Czech Republic)
Edition
The International journal of developmental biology, Spain, University Of The Basque Country Press, 2008, 0214-6282
Other information
Language
English
Type of outcome
Article in a journal
Field of Study
Genetics and molecular biology
Country of publisher
Spain
Confidentiality degree
is not subject to a state or trade secret
Impact factor
Impact factor: 2.359
RIV identification code
RIV/00216224:14110/08:00026133
Organization unit
Faculty of Medicine
UT WoS
000256177000004
Keywords in English
hESCs; human embryonic stem cell; growth factor production; undifferentiated growth
Tags
International impact
Changed: 25/6/2009 11:29, prof. Ing. Petr Dvořák, CSc.
V originále
Various types of feeder cells have been adopted for the culture of human embryonic stem cells (hESCs) to improve their attachment and provide them with stemness-supporting factors. Here, we compared the expression and secretion of four well-established regulators of hESC pluripotency and/or differentiation among five lines of human foreskin fibroblasts and primary mouse embryonic fibroblasts throughout a standard hESC culture procedure. We found that production of TGFbeta1, activin A, and FGF-2 varied considerably among the human-derived feeder cell lines. Low- and high-producing human feeder cells as well as mouse feeder cells were evaluated for their ability to support the undifferentiated growth of hESCs and for the expression of stem cell markers. Our results suggest that the ability of a feeder layer to promote the undifferentiated growth of hESCs is attributable to its characteristic growth factor production.
In Czech
Existuje mnoho typů buněk, které používáme jako tzv. "feedrové" (podpůrné) buňky vhodné pro kultivaci lidských embryonálních kmenových buněk (dále jen lidské ES buňky) a jejich funkcí je především zabezpečení ideálních podmínek a faktorů podporujících sebeobnovu a pluripotenci těchto buněk. Buňky podpůrné vrstvy se však liší ve svých schopnostech podporovat růst nediferencovaných lidských ES buněk. V této práci srovnáváme expresi a sekreci čtyř nejznámějších regulátorů pluripotence a/nebo diferenciace u pěti linií lidských fibroblastů a primárních myších embryonálních fibroblastů během standardní kultivace lidských ES buněk. Zjistili jsme, že lidské a myší podpůrné buňky vylučují srovnatelné hladiny TGFbeta1. Myší podpůrné buňky produkují větší množství activinu A než lidské podpůrné buňky. Na druhou stranu FGF-2, který je produkován lidskými podpůrnými buňkami, nebyl detegován v kultivačním médiu z myších fibroblastů. Nedetegovali jsme žádné významné hladiny BMP-4, přestože BMP-4 dimery jsou přítomny u všech typů podpůrných buněk. Produkce růstových faktorů TGFbeta1, activinu A a FGF-2 se u lidských fibroblastů výrazně lišila. Vybrali jsme takové feedrové buňky, které produkovali nejvíc a nejmíň růstových faktorů a hodnotili jsme jejich schopnost podporovat nediferencovaný růst lidských ES buněk. Zjistili jsme, že signifikantně menší proporce lidských ES buněk kultivovaná na lidských podpůrných buňkách exprimovala SSEA3 - jeden z nejvýznamnějších markrů nediferencovaných buněk. Exprese SSEA3 a tím i pluripotence lidských ES buněk můžou být obnoveny přídavkem activinu A. Tyto výsledky naznačují, že schopnost podpůrné vrstvy podporovat nediferencovaný růst lidských ES buněk, je vlastností úzce spojenou s produkcí růstových faktorů.