Další formáty:
BibTeX
LaTeX
RIS
@proceedings{820606, author = {Buchtíková, Soňa and Vojtek, Libor and Hyršl, Pavel}, booktitle = {Sborník abstraktů Zoologické dny Brno 2009}, keywords = {fish immune system; cell immunity; humoral immunity; oxidative burst; phagocyte; reactive oxygen metabolites; complement; lysozyme; antibodies}, language = {cze}, isbn = {978-80-87189-03-0}, title = {Stanovení vybraných parametrů imunitního systému ryb}, year = {2009} }
TY - CONF ID - 820606 AU - Buchtíková, Soňa - Vojtek, Libor - Hyršl, Pavel PY - 2009 TI - Stanovení vybraných parametrů imunitního systému ryb SN - 9788087189030 KW - fish immune system KW - cell immunity KW - humoral immunity KW - oxidative burst KW - phagocyte KW - reactive oxygen metabolites KW - complement KW - lysozyme KW - antibodies N2 - Imunitní systém ryb můžeme rozdělit na složku buněčnou a humorální. Buněčná složka nespecifická je tvořena fagocyty a cytotoxickými buňkami, specifická T a B lymfocyty. Humorální imunitu nespecifickou zastupují lektiny, lytické enzymy (např. lysozym) a komplement, specifickou protilátky třídy IgM. Na našem pracovišti měříme z nespecifických složek imunity oxidativní vzplanutí fagocytů v plné krvi, aktivitu komplementového systému v plasmě a koncentraci lysozymu v kožním mukusu. Ze složek specifické imunity stanovujeme koncentraci protilátek IgM. Oxidativní vzplanutí fagocytů se provádí luminiscenční metodou. Plná heparinizovaná krev je po naředění smíchána s luminolem a aktivátorem, který se váže na receptory fagocytů a způsobuje jejich aktivaci. Nejdůležitějšími ukazateli oxidativního vzplanutí fagocytů jsou vrchol luminiscenční kinetické odpovědi, čas jeho dosažení a celkové vyprodukované množství reaktivních metabolitů kyslíku. Ke stanovení aktivity komplementu v plasmě se používá luminiscenční metoda. Využívá rekombinantní bioluminiscenční bakteriální kmen E. coli. Světelná emise vyžaduje přítomnost ATP, produkovaného pouze živými buňkami. Intenzita produkovaného světla odpovídá viabilitě bakterií. Z grafu závislosti luminiscence na čase je odečtena doba potřebná pro usmrcení 50% bakterií. Množství lysozymu lze stanovit in vitro radiální difúzí v agaróze. Na agarové plotny obsahující Micrococcus luteus se nanesou vzorky kožního mukusu nebo kalibrační roztok lysozymu. Průměry projasněných difúzních zón se přepočítají podle kalibrační křivky na mg/ml vzorku. Celkové množství protilátek IgM v rybí plasmě lze stanovit precipitací síranem zinečnatým, který specificky dehydratuje proteiny, ty se odpojí od roztoku a jsou odděleny centrifugací. Množství IgM ve vzorku (v g/l) je pak vypočítáno jako rozdíl mezi celkovým obsahem proteinů a proteinů obsažených v supernatantu po precipitaci a centrifugaci. Tato práce byla podpořena grantem GAČR 524/07/0188. ER -
BUCHTÍKOVÁ, Soňa, Libor VOJTEK a Pavel HYRŠL. Stanovení vybraných parametrů imunitního systému ryb. In \textit{Sborník abstraktů Zoologické dny Brno 2009}. 2009. ISBN~978-80-87189-03-0.
|