Stanovení celkové hladiny IgM u sladkovodních ryb

VOJTEK, Libor, Karel VOSTAL, Andrea VETEŠNÍKOVÁ ŠIMKOVÁ, Lukáš VETEŠNÍK, Karolína LAMKOVÁ and Pavel HYRŠL. Stanovení celkové hladiny IgM u sladkovodních ryb (Determination of total IgM level in freshwater fish). In Sborník abstraktů Zoologické dny Brno 2009. 2009. ISBN 978-80-87189-03-0.

Basic information

• Original name: Stanovení celkové hladiny IgM u sladkovodních ryb
• Name in Czech: Stanovení celkové hladiny IgM u sladkovodních ryb
• Name (in English): Determination of total IgM level in freshwater fish
• Authors: VOJTEK, Libor (203 Czech Republic, belonging to the institution), Karel VOSTAL (203 Czech Republic, belonging to the institution), Andrea VETEŠNÍKOVÁ ŠIMKOVÁ (703 Slovakia, belonging to the institution), Lukáš VETEŠNÍK (203 Czech Republic), Karolína LAMKOVÁ (203 Czech Republic, belonging to the institution) and Pavel HYRŠL (203 Czech Republic, guarantor, belonging to the institution).
• Edition: Sborník abstraktů Zoologické dny Brno 2009, 2009.

Other information

• Original language: Czech
• Type of outcome: Conference abstract
• Field of Study: 30102 Immunology
• Country of publisher: Czech Republic
• Confidentiality degree: is not subject to a state or trade secret
• RIV identification code: RIV/00216224:14310/09:00029201
• Organization unit: Faculty of Science
• ISBN: 978-80-87189-03-0
• Keywords in English: fish immunity; IgM; precipitation; Tinca tinca; Cyprinus carpio; Carassius auratus
• Tags: Carassius auratus, Cyprinus carpio, fish immunity, IgM, Precipitation, Tinca tinca
• Tags: International impact

Abstract

Imunitní systém ryb je stejně jako imunitní systém obratlovců složen ze specifických a nespecifických složek buněčné a humorální imunity. Hlavní součástí specifické humorální imunity jsou protilátky imunoglobuliny (Ig). Ig se specificky váží na antigen a zpřístupňují jej ostatním složkám imunitního systému. U ryb se na rozdíl od vyšších obratlovců nachází pouze IgM, kdy tetramerní molekula je nejčastěji tvořena 4 monomery spojenými J-řetězcem. Pro stanovení Ig ryb se používá velké množství metod (RIA, FIA, EIA, imunoprecipitace), které jsou složité na přípravu, časově náročné a díky velké spotřebě monoklonálních protilátek drahé (pro některé druhy ryb ani nejsou protilátky dostupné). Srážení síranem zinečnatým (ZnSO4 . 7H2O) je jednoduchá, levná a časově nenáročná metoda, která využívá fyzikálně-chemických vlastností ZnSO4 . 7H2O. Metoda je běžná ve veterinární praxi. ZnSO4 . 7H2O odebírá selektivně imunoglobulinům v roztoku vodu a ty poté z roztoku vypadávají, vzniká sraženina. Metoda je doplněna stanovením bílkovin, kdy se výsledná koncentrace IgM rovná rozdílu mezi bílkovinami obsaženými v celém vzorku a v supernatantu po vysrážení IgM. Pro naše experimenty byla použita plasma kapra obecného (Cyprinus carpio) odebíraná v různých ročních obdobích, lína obecného (Tinca tinca) s různými ploidiemi a karasa stříbřitého (Carassius auratus) s různými ploidiemi včetně kříženců. U kapra obecného byla zjištěna statisticky významná sezónní dynamika hladiny IgM s nejvyššími hodnotami v červnu 20,15 g/l a nejnižšími v srpnu 12,42 g/l. Rovněž byly zaznamenány statisticky významné rozdíly mezi pohlavími, s vyššími průměrnými hodnotami IgM u samic kapra i lína. Diploidní (2n), triploidní (3n) a gynogenní (G) skupiny lína se statisticky neliší, i když G ryby mají průměrně vyšší hladinu IgM než 2n a 3n. 2n a 3n karasi se opět statisticky neliší, i když průměrná hladina IgM 2n je nižší než 3n a kříženců. Tato práce byla podpořena granty GAČR 524/07/0188 a 524/09/P620.

Abstract (in English)

Imunitní systém ryb je stejně jako imunitní systém obratlovců složen ze specifických a nespecifických složek buněčné a humorální imunity. Hlavní součástí specifické humorální imunity jsou protilátky imunoglobuliny (Ig). Ig se specificky váží na antigen a zpřístupňují jej ostatním složkám imunitního systému. U ryb se na rozdíl od vyšších obratlovců nachází pouze IgM, kdy tetramerní molekula je nejčastěji tvořena 4 monomery spojenými J-řetězcem. Pro stanovení Ig ryb se používá velké množství metod (RIA, FIA, EIA, imunoprecipitace), které jsou složité na přípravu, časově náročné a díky velké spotřebě monoklonálních protilátek drahé (pro některé druhy ryb ani nejsou protilátky dostupné). Srážení síranem zinečnatým (ZnSO4 . 7H2O) je jednoduchá, levná a časově nenáročná metoda, která využívá fyzikálněchemických vlastností ZnSO4 . 7H2O. Metoda je běžná ve veterinární praxi. ZnSO4 . 7H2O odebírá selektivně imunoglobulinům v roztoku vodu a ty poté z roztoku vypadávají, vzniká sraženina. Metoda je doplněna stanovením bílkovin, kdy se výsledná koncentrace IgM rovná rozdílu mezi bílkovinami obsaženými v celém vzorku a v supernatantu po vysrážení IgM. Pro naše experimenty byla použita plasma kapra obecného (Cyprinus carpio) odebíraná v různých ročních obdobích, lína obecného (Tinca tinca) s různými ploidiemi a karasa stříbřitého (Carassius auratus) s různými ploidiemi včetně kříženců. U kapra obecného byla zjištěna statisticky významná sezónní dynamika hladiny IgM s nejvyššími hodnotami v červnu 20,15 g/l a nejnižšími v srpnu 12,42 g/l. Rovněž byly zaznamenány statisticky významné rozdíly mezi pohlavími, s vyššími průměrnými hodnotami IgM u samic kapra i lína. Diploidní (2n), triploidní (3n) a gynogenní (G) skupiny lína se statisticky neliší, i když G ryby mají průměrně vyšší hladinu IgM než 2n a 3n. 2n a 3n karasi se opět statisticky neliší, i když průměrná hladina IgM 2n je nižší než 3n a kříženců. Tato práce byla podpořena granty GAČR 524/07/0188 a 524/09/P620.

Links

• GA524/07/0188, research and development project: Name: Úloha imunitní investice v kontextu kompromisů: imunoekologické studium vztahů mezi reprodukcí, imunitou a parazitizmem u sladkovodních ryb

Investor: Czech Science Foundation, The role of immune investment in the context of trade-offs: immuno-ecological study of the relationships among reproduction, immunity and parasitism