Stanovení minimální zbytkové nemoci u B-buněčné chronické lymfocytární leukemie: možnosti a vývoj metodických přístupů založených na PCR a RQ-PCR

SKUHROVÁ FRANCOVÁ, Hana, Boris TICHÝ, Karla PLEVOVÁ, Jiří MAYER a Šárka POSPÍŠILOVÁ. Stanovení minimální zbytkové nemoci u B-buněčné chronické lymfocytární leukemie: možnosti a vývoj metodických přístupů založených na PCR a RQ-PCR. Transfuze a hematologie dnes. Praha: Česká lékařská společnost J E Purkyně, 2009, roč. 15, č. 4, s. 197-203. ISSN 1213-5763.

Základní údaje

• Originální název: Stanovení minimální zbytkové nemoci u B-buněčné chronické lymfocytární leukemie: možnosti a vývoj metodických přístupů založených na PCR a RQ-PCR
• Název anglicky: Assessment of minimal residual disease in B-cell chronic lymhocytic leukemia: options and advancement of techniques based on PCR and RT-PCR
• Autoři: SKUHROVÁ FRANCOVÁ, Hana (203 Česká republika, garant), Boris TICHÝ (203 Česká republika), Karla PLEVOVÁ (203 Česká republika), Jiří MAYER (203 Česká republika) a Šárka POSPÍŠILOVÁ (203 Česká republika).
• Vydání: Transfuze a hematologie dnes, Praha, Česká lékařská společnost J E Purkyně, 2009, 1213-5763.

Další údaje

• Originální jazyk: čeština
• Typ výsledku: Článek v odborném periodiku
• Obor: 30200 3.2 Clinical medicine
• Stát vydavatele: Česká republika
• Utajení: není předmětem státního či obchodního tajemství
• Kód RIV: RIV/00216224:14310/09:00038553
• Organizační jednotka: Přírodovědecká fakulta
• Klíčová slova česky: hronická lymfocytární leukemie (CLL); gen pro těžký imunoglobulinový řetězec (IgVh); minimální reziduální nemoc (MRD); PCR v reálném čase (RQ-PCR)
• Klíčová slova anglicky: chronic lymphocytic leukemia (CLL); imunoglobulin heavy-chain gene (IgVh); minimal residual disease (MRD); real-time quantitative PCR (RQ-PCR)
• Příznaky: Recenzováno

Anotace

Stanovení minimální zbytkové nemoci (MRD) poskytuje důležitou informaci o léčebné odpovědi u hematologických malignit včetně chronické lymfocytární leukemie (CLL). Pro kontrolu dosažení remise onemocnění probíhá vývoj dostatečně citlivých kvantitativních metod detekce MRD na molekulární úrovni. Vedle mezinárodního protokolu na detekci minimální zbytkové nemoci u CLL pomocí čtyřbarevné průtokové cytometrie představuje jednu z nejcitlivějších kvantitativních metod metoda polymerázové řetězové reakce v reálném čase (RQ-PCR). Identifikace maligního klonu je založena na unikátní Vh-D-Jh přestavbě variabilní části genu těžkého imunoglobulinového řetězce (IgVh) a kvantitativní alelově specifické (ASO-allele specific oligonucleotide) PCR, která umožňuje příznivý posun detekčního limitu MRD o jeden až dva řády. Metoda detekce MRD je založena na využití kombinace pacient specifických primerů a dvou TaqMan sond rozeznávajících sekvence Jh subgenů 1, 4, 5, 6 a lze ji použít u 90% pacientů s diagnózou CLL. Aktualizovaný přístup využívá LNA (Locked Nucleic Acid) TaqMan sondy rozeznávající Vh subgeny. Kombinace LNA modifikované sondy a pacient specifických primerů představuje dostatečně specifický a sensitivní přístup ke stanovení MRD u pacientů.

Anotace anglicky

Detection of minimal residual disease (MRD) persistence provides essential information on the treatment response in hematologic malignancies including chronic lymphocytic leukemia (CLL). Improved quantitative techniques for MRD quantification on molecular basis with sufficient sensitivity are warranted to monitor the therapeutical goal-complete erradication of MRD. In addition to international standardized four-color flow cytometric CLL-MRD assay, real time polymerase chain reaction (RQ-PCR) represents one of the most sensitive methods for MRD assesment. The malignant clone can be identifed by its unique immunoglobulin heavy chain (IgH) gene rearrangement; allele-specific (ASO) IgH RQ-PCR allows to achieve higher sensitivity limit up to two orders of magnitude. Currently, the monitoring of MRD is based on combination of patient specific primers and two different consensus TaqMan probes recognizing the JH subgenes 1,4, 5, 6 and is applicable to just about 90% of all CLL cases. The updated approach is based on limited number of LNA-modified (Locked Nucleic Acid) TaqMan probes designed to consensus sequences in the framework region 3 (FR3) of the seven Vh gene families . LNA -modified probes and IgH-RQ PCR represent highly specific and sensitive method of MRD assesment in patients with CLL.

Návaznosti

• MSM0021622430, záměr: Název: Funkční a molekulární charakteristiky nádorových a normálních kmenových buněk - identifikace cílů pro nová terapeutika a terapeutické strategie

Investor: Ministerstvo školství, mládeže a tělovýchovy ČR, Funkční a molekulární charakteristiky nádorových a normálních kmenových buněk - identifikace cílů pro nová terapeutika a terapeutické strategie

• NS10439, projekt VaV: Název: Analýza změn genomu a jeho exprese u pacientů s chronickou lymfocytární leukémií v průběhu vývoje onemocnění.