2010
Cloning and expression of endolysin and its SH3 domain from polyvalent staphylococcal bacteriophage
BENEŠÍK, Martin, Lubomír JANDA, Radka DOPITOVÁ, Jiří DOŠKAŘ, Roman PANTŮČEK et. al.Základní údaje
Originální název
Cloning and expression of endolysin and its SH3 domain from polyvalent staphylococcal bacteriophage
Název česky
Klonování a exprese endolyzinu a jeho SH3 domény z polyvalentního stafylokokového bakteriofága
Autoři
BENEŠÍK, Martin (203 Česká republika), Lubomír JANDA (203 Česká republika, domácí), Radka DOPITOVÁ (203 Česká republika, domácí), Jiří DOŠKAŘ (203 Česká republika, domácí) a Roman PANTŮČEK (203 Česká republika, garant, domácí)
Vydání
1. vydání. Brno, XIV. Setkání biochemiků a molekulárních biologů. Sborník příspěvků, od s. 45-46, 2 s. 2010
Nakladatel
Masarykova univerzita
Další údaje
Jazyk
angličtina
Typ výsledku
Stať ve sborníku
Obor
Genetika a molekulární biologie
Stát vydavatele
Česká republika
Utajení
není předmětem státního či obchodního tajemství
Odkazy
Kód RIV
RIV/00216224:14310/10:00044000
Organizační jednotka
Přírodovědecká fakulta
ISBN
978-80-210-5164-5
Klíčová slova česky
bakteriofág; Staphylococcus aureus; lyze bakterií; lytické enzymy; příprava proteinů
Klíčová slova anglicky
bacteriophage; Staphylococcus aureus; bacteriolysis; lytic enzymes; protein preparetion
Příznaky
Mezinárodní význam
Změněno: 27. 3. 2012 12:38, Mgr. et Mgr. Veronika Oškerová, Ph.D.
V originále
Endolysins are phage lytic proteins which digest the cell wall of bacteria. Here we report expression of the genes encoding lytic proteins from bacteriophage 812. This enzymes lyses cells of Staphylococcus aureus and could have practical use in phage therapy. Activity of lytic enzymes was tested on different S. aureus strains that are insensitive to wild-type phage 812 and are resistant to antibiotics. The enzymes were active against a broader range of bacterial strains than the phage itself. Lytic protein of phage 812 includes three domains. SH3-domain is probably cell wall targeting domain, which could be responsible for binding of endolysin to peptidoglycan. SH3b-domain of phage 812 has been cloned and expressed as a soluble protein in E. coli. Protein was purified to homogeneity using ammonium sulphate precipitation, anion exchange chromatography, cation exchange chromatography, and gel filtration.
Česky
Endolyziny jsou fágové lytické proteiny, které rozkládají buněčnou stěnu bakterií. V této práci přinášíme informaci o klonování a expresi genů kódujících lytické enzymy fága 812. Aktivita lytických enzymů byla testována na souboru kmenů Staphylococcus aureus, které nebyly citlivé k fágu 812, nebo byly rezistentní k antibiotikům. Enzymy byly účinné proti širšímu spektru bakteriálních kmenů než samotný fág. Rozmezí hostitele může být ovlivněno schopností lytického enzymu navázat se na buněčnou stěnu bakterie. Lytický enzym fága 812 tvoří 3 domény. SH3-doména pravděpodobně zprostředkovává navázání enzymu na peptidoglykan buněčné stěny. Pro účely určení trojrozměrné struktury metodou krystalografie, byl klonován gen pro SH3-doménu lytického enzymu. Protein byl přečištěn pomocí srážení síranem amonným, aniontově výměnné chromatografie, kationtově výměnné chromatografie a gelové chromatografie.
Návaznosti
| MSM0021622415, záměr |
|